Жидкая соединительная ткань лимфа

Кровь, циркулируя в замкнутой системе кровообращения, выполняет трофическую, защитную, регуляторную и другие функции.

В крови различают жидкое межклеточное вещество — плазму и форменные элементы — эритроциты, лейкоциты и кровяные пластинки.

Плазма — жидкая составная часть крови, содержит 90—92% воды и 8—10% сухих веществ, в составе которых около 1% минеральных и 9% органических веществ. Органические вещества представлены белками (альбумины, глобулины, фибриноген), которые синтезируются в печени. Альбумины обеспечивают перенос веществ; в глобу- линовой фракции содержатся иммунные белки — антитела, называемые иммуноглобулинами; фибриноген участвует в свертывании крови. Часть плазмы без фибриногена — сыворотка.

Эритроциты рыб, амфибий, рептилий, птиц содержат ядра. У млекопитающих эритроциты безъядерные, имеют форму двояковогнутого диска, участвуют в транспортировке газов и переносе адсорбированных на оболочке аминокислот, ферментов и др. В цитоплазме отсутствуют органоиды, и 90-95% сухого вещества приходится на гемоглобин. Образуясь в красном костном мозге, эритроциты циркулируют 100—130 суток в крови и разрушаются в селезенке, гемоглобин разрушается в печени.

Кровяные пластинки участвуют в свертывании крови, сходны по функции с кровяными пластинками, тромбоциты рыб, амфибий, рептилий, птиц представлены овальными клетками с ядром. Кровяные пластинки — безъядерные элементы сосудистой крови млекопитающих, представляют собой небольшие цитоплазматические фрагменты, отделившиеся от мегакариоцитов красного костного мозга. Кровяные пластинки обеспечивают основные этапы остановки кровотечения — гемостаза. В участке повреждения эндотелия сосуда и обнажения базальной мембраны происходят оседание и агрегация (слипание) пластинок. Пластинки становятся шаровидными и выделяют ряд соединений, образующих сгусток (тромб), препятствующий выходу форменных элементов крови из поврежденного сосуда. В сосудистой крови пластинки существуют около 9—10 суток, после чего происходит фагоцитоз, главным образом макрофагами селезенки.

Лейкоцитов в крови в 600—800 раз меньше, чем эритроцитов. Лейкоциты выполняют защитную функцию, образуются в красном костном мозге и лишь непродолжительное время пребывают в сосудистом русле.

Дифференциация морфологических признаков лейкоцитов зависит от наличия зернистости цитоплазмы (зернистые и незернистые) и сегментации ядерного материала (рис. 36).

Зернистые лейкоциты (гранулоциты), как правило, имеют расчлененное на сегменты ядро, поэтому называются сегментоядерными. В соответствии с зернистостью выделяют три вида клеток: нейтрофилы — зернистость окрашивается кислыми и основными красителями; эозинофилы — зернистость окрашивается кислыми, базо- филы — зернистость окрашивается основными красителями.

Нейтрофилы составляют от 25 до 70% всех лейкоцитов, имеют диаметр 8,0—12,0 мкм; благодаря хемотаксису (направленному движению) мигрируют из кровеносных капилляров в соединительную

Рис. 36 [18]. Морфология крови:

7 — нейтрофилы; 2 — эозинофилы; 3 — базофилы; 4 — лимфоцит; 5 — плазмоцит; б — моноцит; 7 — кровяные пластинки; 8 — эритроцит

ткань, где накапливаются в очаге воспаления и осуществляют фагоцитарную функцию, обеспечивая очищение очага воспаления от микроорганизмов и продуктов распада. Эти лейкоциты лишь несколько часов циркулируют в сосудистой крови, за счет высокой фагоцитарной активности названы И.И. Мечниковым микрофагами. В цитоплазме обнаруживают небольшое количество включений гликогена, и две разновидности гранул, окрашивающихся как основными, так и кислыми красителями. Эозинофилы составляют от 2 до 12% всех лейкоцитов, по размерам крупнее нейтрофилов, имеют диаметр 12—18 мкм. Эозинофилы обладают хемотаксисом, хемотакси- ческими веществами являются комплексы антиген-антитело, гистамин и другие факторы, выделяемые тканевыми базофилами. Во время фагоцитоза происходит высвобождение из гранул многих ферментов, с помощью которых осуществляется антигистаминная функция, т.е. ограничение воспалительного процесса. Число эози- нофилов резко увеличивается при паразитарных болезнях. Базофилы — самая малочисленная разновидность зернистых лейкоцитов, составляют 0,5—2,0% всех лейкоцитов, диаметр — 10—12 мкм. Базофилы участвуют в иммунных реакциях аллергического типа. На поверхности базофилов расположены рецепторы, с помощью которых связываются иммуноглобулины, присоединение антигенов (аллергенов) и образование комплекса антиген-антитело вызывают выход значительного количества гепарина и гистамина — высокоактивных веществ, содержащихся в гранулах.

Незернистые лейкоциты (агранулоциты) характеризуются отсутствием специфической зернистости в цитоплазме и несегментиро- ванными ядрами; делятся на моноциты и лимфоциты.

Моноциты составляют от 1 до 8% всех лейкоцитов сосудистой крови. Это самые крупные из лейкоцитов, диаметр — 18—20 мкм и более. Чаще всего имеют бобовидной формы ядро, содержащий конденсированный хроматин и мелкие ядрышки. Циркулирующие в крови моноциты являются предшественниками тканевых макрофагов, поэтому отнесены к системе мононуклеарных фагоцитов (СМФ). После пребывания в сосудистой крови моноциты мигрируют через эндотелий капилляров в ткани, и дифференцируются в фиксированные и подвижные макрофаги. Лимфоциты — многочисленная группа лейкоцитов, у большинства животных составляет 40—65% от общего числа лейкоцитов. Лимфоциты малые (4—6 мкм) и средние (7—10 мкм) локализуются в периферической крови, большие (Ills мкм) — в органах кроветворения. По функциональному значению различают два основных класса лимфоцитов: тимусзависимые (Г-лимфоциты) и бурсазависимые (^-лимфоциты), названные так из-за того, что у птиц они образуются в фабрициевой сумке (Bursa). Г-лимфоциты путем непосредственного контактного воздействия или с помощью близкодействующих токсических медиаторов (лим- фокинов) разрушают чужеродные клетки-мишени или изменившиеся клетки организма. Такой тип обезвреживания антигенов (не сопровождающийся выработкой растворимых антител) называют клеточным иммунитетом, который характерен при отторжении трансплантатов, при реакциях гиперчувствительности замедленного типа и разрушении опухолевых клеток; при аутоиммунных реакциях. Г-лимфоциты дифференцируются в корковой части долек тимуса из клеток красного костного мозга, а в селезенке и лимфатических узлах при внедрении антигена могут дифференцироваться в активные клетки: Г-киллеры, Г-хелперы, Г-супрессоры. ^-лимфоциты способны продуцировать антитела — белки иммуноглобулины, участвующие в гуморальном иммунном ответе. При гуморальном иммунитете в кровь или лимфу поступают специфические белки—антитела, обезвреживающие антигены. Антитела образуются плазматическими клетками, которые образуются в результате дифференцировки ^-лимфоцитов.

Препарат «Мазок крови кролика» (окраска гематоксилином и эозином). Кровь изучается на мазках, для приготовления которых капля крови распределяется ровным тонким слоем по предметному стеклу, фиксируется и окрашивается. Рассмотрите препарат при слабом увеличении (х10), затем при сильном увеличении (х40). Основную массу клеток в поле зрения микроскопа составляют округлой формы безъядерные эритроциты, цитоплазма эритроцита окрашена эозином, центральная часть клетки более светлая. По наличию зерен в цитоплазме и строению ядра необходимо научиться различать лейкоциты. Из числа зернистых лейкоцитов часто будут попадаться нейтрофилы, в цитоплазме которых имеются зерна, окрашенные гематоксилином в синий цвет, и эозином — в розовый цвет, т.е. наблюдается нейтральное отношение к основному и кислому красителям, отсюда название — нейтрофил, ядро состоит из двух-трех и более сегментов (рис. 37).

Эозинофилы встречаются реже, ядро клеток состоит из двух сегментов; зерна в цитоплазме крупные, имеют отчетливую красную окраску. Базофилов очень мало, и на препаратах они попадаются крайне редко. У этих клеток ядра не имеют отчетливых контуров из-за наличия в цитоплазме большого количества темно-фиолетовых зерен, окрашивающихся основным (базальным) красителем. Из незернистых лейкоцитов чаще встречаются лимфоциты, имеющие округлые, темно-фиолетовые ядра, реже — моноциты, имеющие темно-фиолетовые ядра бобовидной формы, сходные с семенем фасоли. Кровяные пластинки имеют неопределенную форму, мелкие тельца, часто склеиваются один с другим.

Препарат «Мазок крови крупного рогатого скота» (окраска по Паппенгейму). Метод окраски основан на комбинации метиленового синего (или его производного — азура) и эозина. Рассматривая препарат при слабом увеличении (х10), найти множество эритроци-

Рис. 37 [18]. Морфология крови:

а — мазок крови млекопитающих: 7 — эритроцит; 2 — малый лимфоцит; 3 — базофил; 4, 6,8, 10 — нейтрофилы; 5, 13 — эозинофил; 7 — средний лимфоцит; 9 — кровяные пластинки; 7 7 — моноцит; 72 — большой лимфоцит; б — мазок крови птицы:

• 7 — эритроцит; 2 — плазмоцит; 3 — моноцит; 4 — малый лимфоцит;
• 5 — сегментоядерный эозинофил; б — базофил; 7 — эозинофильный миелоцит;
• 8 — разрушенный эритроцит; 9 — средний лимфоцит; 10 — тромбоциты; 7 7 —большой лимфоцит; 12, 13, 14 — псевдоэозинофилы; 75 — полихроматофильный эритроцит;
• 16 — разрушенный эритроцит тов, окрашенных в бледно-розовый цвет; среди них заметны темно окрашенные ядра лейкоцитов. Выбрать участок тонкого мазка и при сильном увеличении (х40) рассмотреть и зарисовать основные форменные элементы крови. Эритроциты окрашены эозином в розовый цвет, имеют форму диска, в центре более тонкого; это место, где до окончательного сформирования эритроцита находилось ядро. Для того чтобы предвидеть, какие формы лейкоцитов искать, необходимо знать лейкоцитарную формулу крупного рогатого скота: Н — 29,0; Э — 7,0; Б — 0,5; Л — 57; М — 6,5. Найти все лейкоциты в одном поле зрения не удастся, поэтому придется передвигать препарат и сделать комбинированный рисунок. Кровь крупного рогатого скота имеет лимфоцитарный профиль, поэтому чаще всего будут встречаться малые лимфоциты, которые легко узнать по круглому, сильно закрашенному ядру и узкому базофильному (голубоватому) ободку цитоплазмы. Этот ободок цитоплазмы хорошо виден только при тщательной окраске мазка и лишь с одной стороны ядра. В цитоплазме лимфоцитов попадаются отдельные, окрашенные в буроватый цвет, так называемые азурофильные зерна (не смешивать со специфической зернистостью, заполняющей цитоплазму зернистых лейкоцитов). Значительно реже встречаются средние лимфоциты с более широким ободком цитоплазмы; в них при хорошей окраске удается заметить светлую околоядерную зону. Далее часто в мазке будут попадаться нейтрофилы, отличающиеся сегментированным, интенсивно окрашенным ядром. При применении иммерсионного объектива можно видеть зернистость нейтрофилов в виде мелких гранул, равномерно заполняющих всю цитоплазму клетки и окрашенных в лиловый тон (средний между тоном основного и кислого красителя). Труднее найти эозинофилы, но на одном мазке можно обнаружить несколько клеток. Эозинофилы выделяются отчетливой красной окраской зернистости в цитоплазме, значительно более крупной, чем зернистость нейтрофилов. Ядро эозинофилов чаще всего поделено на два-три сегмента. Моноциты можно найти без особого труда — это крупные клетки с широким ободком базофиль- ной цитоплазмы, ядра имеют бобовидную форму. Труднее всего найти базофилы, которые распознаются по темно-фиолетовой окраске зерен в цитоплазме, часто маскирующей ясные контуры ядра. Так как по отношению к другим формам лейкоцитов базофилов менее 1%, на препаратах они встречаются достаточно редко. Поэтому для рассмотрения базофилов используют демонстрационный препарат. Кровяные пластинки имеют вид базофильных телец неопределенной формы, с неясной зернистостью в центре и часто склеиваются один с другим.

Препарат «Мазок крови курицы» (окраска по Романовскому— Гимза). Рассмотрите препарат при слабом увеличении (х10), затем при сильном увеличении (х40). Обратите внимание, что эритроциты содержат ядра, характерные для крови классов позвоночных, исключая млекопитающих. Другой особенностью, отличающей кровь птицы от крови млекопитающих, являются тромбоциты, представляющие собой клетки. На этом препарате также необходимо ознакомиться с частными особенностями крови, характерными в той или другой степени для класса птиц. Эритроциты имеют овальную форму, их цитоплазма окрашена в розовый цвет. В центре эритроцита видно интенсивно окрашенное овальное ядро. Нейтрофилы птиц содержат гранулы, окрашивающиеся эозином в ярко-красный цвет. За счет выраженного сродства с кислыми красителями нейтрофилы птиц названы псевдоэозинофилами. В целом структура других лейкоцитов имеет сходство с таковыми у млекопитающих. Тромбоциты — овальные клетки, значительно более мелкие, чем эритроциты. Цитоплазма тромбоцитов базофильная, образует узкий ободок вокруг овального ядра, обычно диффузно закрашивающегося (рис. 37, б).

Лимфа (от лат. limpha — чистая вода) — прозрачная желтоватая жидкость, находящаяся в полости лимфатических капилляров и лимфатических сосудов — состоит из жидкой части (плазмы) и форменных элементов. Плазма лимфы отличается от плазмы крови меньшим содержанием белков. Основными клетками лимфы являются лимфоциты, поэтому за сутки в кровяное русло с лимфой поступает огромное число лимфоцитов, в несколько раз превышающее их количество в крови. В этом заключается защитная роль лимфатической системы, так как иммунокомпетентные клетки — лимфоциты через систему периферических органов лимфоидной ткани, рециркулируют в кровеносном русле. Лимфа поддерживает гомеостаз в тканях и метаболическую регуляцию, участвует в транспорте электролитов, белков, воды и минеральных веществ.

Кровь представляет собой коллоидный раствор в виде вязкой жидкости; узкие капилляры оказывают сопротивление, в результате чего гидростатическое давление крови неуклонно снижается от артериального отдела капилляра к венозному. Поэтому у артериальных отделов капилляров гидростатическое давление выше осмотического, и вода выталкивается через щели между эндотелиальными клетками, образуя тканевую жидкость. У венозных отделов капилляров гидростатическое давление ниже создаваемого коллоидами крови, поэтому вода (тканевая жидкость) здесь насасывается обратно в капилляр. Это приводит к циркуляции тканевой жидкости в основном веществе рыхлой волокнистой неоформленной соединительной ткани, образующей прослойки тканей, а также оболочки и строму органов. Лимфа и представляет собой часть плазмы крови, которая просачивается через эндотелий кровеносных капилляров в виде тканевой жидкости, поступающей вместе с продуктами обмена веществ, в лимфатические капилляры. При нормальных условиях из капилляров выделяются только очень мелкие коллоидные частицы, которые попадают обратно в кровоток. В образовании лимфы значение имеют, таким образом, взаимоотношения гидростатического и осмотического давлений крови и тканевой жидкости, проницаемость кровеносных капилляров, а также физико-химическое состояние основного вещества соединительной ткани.