Смешанная культура лимфоцитов как сдавать
Вторая часть эфира 2 июля.
HLA-гены и иммунология репродукции. Кожный лоскут. Иммунизация лимфоцитами (ЛИТ). СКЛ – смешанная культура лимфоцитов. Иммунологический фактор при невынашивании беременности.
Начало: Зачем нужны мужчины? Роль полового размножения. Теория Красной королевы. Введение в иммунологию репродукции.
HLA-гены и иммунология репродукции
Так какая же система самая разнообразная внутри организма и что обеспечивает защиту от инфекций? Это система генов иммунитета – HLA-гены. Все эти гены располагаются на 6-й хромосоме и определяют индивидуальность иммунного ответа, чувствительность к тем или иным стимулам.
Вот здесь как раз речь заходит об иммунологии репродукции, о том, чем занимается наш Центр. Если смотреть наш сайт, то можно увидеть, что существует так называемый аллоиммунный фактор бесплодия и невынашивания беременности. Он связан с антигеном тканевой совместимости, с похожестью или непохожестью по антигенам тканевой совместимости. Риски в репро-дуктивном процессе профессора-имунолога Валентина Ивановича Гавалло, который является родоначальником иммунологии репродукции в нашей стране.
Иммунология репродукции не сразу развивалась, как отдельное направление. Иммунологов всегда интересовало множество других вещей, а иммунология репродукции была интересна в последнюю очередь. Но всё же, в процессе развития в этой области медицины, иммунология репродукции сформировалась в отдельное направление. В какой-то момент было найдено, что есть определённые вещества, которые назвали антигенами тканевой совместимости или главным комплексом гистосовместимости, или системой антиген-лейкоцитов человека. Если эти компоненты совпадают у людей, то можно пересаживать органы и они будут приживаться в новом теле.
Кожный лоскут
Оказывается, что если во время беременности идёт непохожесть между плодом и матерью по антигенам тканевой совместимости, то в организме матери возникает ответ на эти антигены. Тогда в крови матери (и вообще, в крови рожавших женщин) можно обнаружить огромное количество антител против антигенов тканевой совместимости, которые плод наследовал от отца. И находясь внутриутробно, плод вызывал на себя иммунный ответ организма матери.
Исследователями было высказано предположение, что действие этих антител на плод очень вредно, так как в некоторых случаях они повреждали и убивали его. Такие случаи называют «привычное невынашивание беременности».
Для лечения этих случаев и сопутствующих осложнений нашли такой способ: у мужа брали лоскут кожи и подсаживали женщине, чтобы этот лоскут был иммуносорбентом вредных антител, образовавшихся во время предыдущих беременностей. Тогда у плода появлялась возможность спокойно развиваться. Такое лечение невынашивания беременности начали проводить в Америке, в Чехословакии, и далее, в Европе, и оно действительно работало.
В какой-то момент и в России, в Москве решили заниматься таким лечением. В Институте акушерства и гинекологии была создана лаборатория клинической иммунологии, заведующей которой стала Лидия Сергеевна Волкова. Она обратилась с предложением сотрудничества к молодому тогда ещё Валентину Ивановичу Говалло, который простажировался в Чехословакии у Гашека, известного иммунолога-трансплантолога; и посетил лабораторию Дассе в Париже. Гавалло начал разработку систем тканевого типирования ещё в Институте травматологии и ортопедии, и проводил эксперименты по пересадке кожных лоскутов на мышах.
Одной из первых пациенток стала женщина, у которой ранее было 15 выкидышей. Сама беременность наступала у неё легко, но потом она не могла её выносить. И было проведено ей вышеописанное лечение с подсадкой кожного лоскута мужа, которое тоже прошло успешно. А после этой беременности у пациентки были ещё две последующие удачные беременности. И в то время данный случай просто потряс врачей, проводивших это лечение. С тех пор эта методика начала широко применяться в России и в сопредельных государствах.
Иммунизация лимфоцитами
А иммунология репродукции продолжала развиваться. Скоро поняли, что упомянутые кожные лоскуты – не сорбенты, а иммуностимуляторы, вызывающие на себя реакцию отторжения. А эта методика – как раз та самая иммунизация, в процессе которой формируются антитела. И эти антитела – не повреждающего, а защитного характера. Они помогают вовремя распознать беременность внутри полости матки и включить на эту беременность адекватную реакцию, направленную на сохранение и выживание плода. Далее последовало совершенствование этой методики. Где-то на рубеже 70-80-х годов В.И.Говалло на одной конференции в Новосибирске задался вопросом о необходимости пересадки кожного лоскута. Гораздо проще, говорил он, взять из крови мужа лимфоциты (клетки, имеющие на себе высокую концентрацию антигенов тканевой совместимости второго класса) и просто ввести их женщине. И дальнейший результат будет таким же. После конференции с ним связалась профессор Сидельникова, заведующая отделением невынашивания беременности, и предложила начать проводить процедуры иммунизации пациенток предложенным им способом.
И они стали проводить такие процедуры, а их пациентки стали успешно вынашивать беременность. А затем случилось так, что Валентин Иванович поссорился с профессором Сидельниковой, они стали работать отдельно и возникли два способа лимфоцитоиммунизации.
В Центре акушерства и гинекологии процедуру проводили, вводя препарат многократно в небольших количествах.
А по методу Говалло лимфовзвесь вводилась однократно в количестве 200-250 миллионов клеток, и наш Центр выбрал этот метод, хотя оба способа хорошо работают.
СКЛ – смешанная культура лимфоцитов
Валентин Иванович был основным нашим консультантом при создании и открытии клиники, помогал запустить свою методику у нас. Сейчас мы типируем пациентов на гены тканевой совместимости второго класса. При обнаружении такой похожести – делаем иммунизацию лимфоцитами мужа, только мы добавили сюда ещё и смешанную культуру лимфоцитов (СКЛ).
Объясню, почему. Когда ещё я работал на кафедре и учился в аспирантуре, где-то в конце 80-х годов, нашей клинической базой был 7-й роддом, самый близкий к Кремлю, на Воздвиженке. После занятий я шёл в библиотеку имени Ленина и просматривал все новинки в публикациях из разных стран мира.
Одной из них было интересное многотомное «Руководство по акушерству и гинекологии» из Германии, где невынашиванию беременности был посвящен отдельный том. И в этом томе была целая глава по иммунологии невынашивания беременности, где предлагалось использовать смешанные культуры лимфоцитов для выявления пар, которым действительно нужна иммунизация, и отсекать тех, кому не нужна эта процедура. Таким образом я знал про эту дополнительную методику и стал использовать в наших клиниках, хотя многие не применяют её из-за некоторой сложности. У нас в Центре это отдельная программа по аллоиммунному бесплодию.
Иммунологический фактор при невынашивании беременности: роль совпадений по HLA
Но замечу, что не стоит гипертрофировать проблему иммунологического фактора при невынашивании беременности. Да, он значим, но не является единственной проблемой невынашивания.
Здесь немного вернемся опять к истокам генетики. В какой-то момент развития теорий о половом размножении возникла эта идея про совместимость по тканевым антигенам. Потому что половое размножение даёт разнообразие прежде всего по антигенам тканевой совместимости, по антигенам белков иммунной системы. И тогда решили найти такую популяцию, где приветствуется многодетность, где не используют контрацепцию, и где ведут здоровый образ жизни. Чтобы легче было выявить факторы, влияющие на наступление и течение беременности. И нашли подходящую популяцию в виде христианской общины хаттеритов (Гуттерово братство).
В такой популяции имеется полная похожесть супругов по антигенам тканевой совместимости второго класса. И среди их супружеских пар было выявлено, что там увеличен период между началом половой жизни и рождением первого ребёнка; увеличено количество случаев невынашивания беременности; и увеличены интервалы между рождением детей. При этом нет случаев бесплодия. И почти во всех таких супружеских парах более 10-ти детей.
Из этого исследования можно сделать вывод, что всё-таки влияние фактора тканевой совместимости ограничено. Поэтому, когда у нас есть пара с похожестью генов тканевой совместимости (а таких пар всего примерно 15%) в сочетании с невынашиванием беременности, нужно проводить более углубленные обследования по всем направлениям, касающимся невынашивания беременности. Тогда точно может быть выявлена необходимость проведения процедуры лимфоцитоиммунизации.
Продолжение: Внутригеномный конфликт
Источник
СКЛ – смешанная культура лимфоцитов – MLC – mixed lymphocyte culture. Этот тест состоит из набора культур, которые определяют степень распознавания супругами антигенов тканевой совместимости друг друга.
Лимфоцит — центральная клетка иммунной системы. Систему лимфоцитов можно сравнить с государством, где есть начальники и подчиненные, а каждый служащий выполняет специализированную функцию.
В ЦИР вы можете пройти обследование по СКЛ
| Артикул | Наименование услуги | Стоимость |
|---|---|---|
| Оценка риска проблем фертильности по комплексному иммунологическому обследованию супружеской пары | ||
| 3736 | Программа 1: Оценка риска проблем фертильности по комплексному иммунологическому обследованию супружеской пары (первичная консультация акушера-гинеколога,гинеколога-эндокринолога,СКЛ,повторная консультация акушера-гинеколога,гинеколога-эндокринолога) | 13 970 р. |
| 3737 | Программа 2: Оценка риска проблем фертильности по комплексному иммунологическому обследованию супружеской пары (СКЛ, повторная консультация акушера-гинеколога,гинеколога-эндокринолога ) | 12 450 р. |
Если лимфоцит встречает любые чужеродные для организма объекты (бактерии, вирусы, чужие клетки и т. д.), то развивается иммунный ответ. Если речь идет о чужих тканях или клетках, то степень иммунного ответа будет зависеть от похожести конфигурации антигенов тканевой совместимости (HLA, human leucocyte antigens, или MHC, major histocompatibility complex, (это синонимы) антигенов).
Иммунный ответ выражается в появлении клонов (потомков одной клетки) клеток, строго специализированных к конкретным чужеродным факторам). Другими словами, если иммунные клетки начинают реагировать на что-то, они начинают делиться. А деление клеток можно оценить по скорости синтеза ДНК. Чем больше синтезируется ДНК — тем сильнее делятся клетки, тем активнее идет развитие иммунного ответа. Степень синтеза ДНК можно определить по включению в культуру клеток радиоактивного нуклеотида тимидина — “кирпичика” ДНК. На этом принципе основана оценка смешанной культуры лимфоцитов.
Технически это делается следующим образом. У супругов берут кровь, из которой выделяют лимфоциты. Эти лимфоциты помещают в благоприятную для деления питательную среду. Если смешать лимфоциты разных людей, они начнут друг на друга реагировать. Однако если просто зарегистрировать активность смешанной культуры разных людей, невозможно понять, как реагирует конкретный человек, потому что “в бой” вступают клетки всех участников смешанной культуры.
Для того, чтобы оценить индивидуальную реакцию каждого участника культуры, клетки одного из супругов подвергают воздействию, которое делает невозможным деление клеток. Однако антигенные свойства лимфоцитов при этом сохраняются. В такой культуре вся активность клеток будет связана только с живыми клетками другого супруга. Сравнивая различные комбинации культур живых и инактивированных клеток можно получить важную информацию о степени иммунологической похожести супругов.
Фактически в этом анализе, очень трудоемком, ставится 12 различных культур, а оценка реакции проводится на 3-и и 5-е сутки культуры.
Полученные 24 цифры позволяют получить важную информацию о том, как будет реагировать женщина на антигены тканевой совместимости мужа во время беременности.
Дело в том, что сохранение беременности — активный процесс. Так же, как при реакции отторжения, для развития иммунологической толерантности на первом этапе важно адекватное иммунологическое распознавание пришельца. Если это распознавание вялое, или если оно происходит слишком поздно, зародыш атакуется естественными клетками киллерами матери и погибает.
Использование СКЛ, которое было начато в нашем центре с весны 2000 г., позволило значительно улучшить качество лечение пациенток с бесплодием, невынашиванием беременности и неудачными попытками IVF.
Как, зачем и почему мы проводим СКЛ, ЛИТ и HLA-типирование: подборка статей
Источник
1. БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КРОВИ
Отражает состояние всех обменных процессов в организме человека (белковый обмен, углеводный, жировой обмен, электролитный обмен). Каждый вид обмена веществ зависит от работы определенных органов или даже систем органов. Другими словами, биохимический состав крови отражает работу конкретных органов и систем органов.
Например, уровень глюкозы может указать на функциональное состояние поджелудочной железы, печени, гипофиза, надпочечников, жировой ткани и др. Уровень белка крови на состояние печени, почек, желудочно-кишечного тракта и др. Уровень билирубина, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, щелочной фосфатаз указывает на функциональные возможности печени и желчного пузыря.
2. ГОРМОНАЛЬНОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ
Гормоны репродуктивной системы:
1) ЛГ (лютеинизирующий гормон, лютропин) (LH) – 3-5 день цикла
2) ФСГ (фолликул-стимулирующий гормон, фоллитропин) (FSH) – 3-5 день цикла
3) Пролактин (prolactin) – 3-5 день цикла
4) Эстрадиол (E2) (estradiol) – 22-24 день цикла
5) Прогестерон (progesterone) – 22-24 день цикла
6) Тестостерон (testosterone) – 10 день цикла
7) 17-гидроксипрогестерон (17-ОН прогестерон) (17-OH-progesterone) – 10 день цикла
8) Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДЭА-С) (dehydroepiandrosterone-sulfate) – 10 день цикла
9)Андростендион – 10 день цикла
Определение функции щитовидной железы (обязательно провериться тем, у кого с ней проблемы)
1) ТТГ (тиреотропный гормон, TSH) 3-5 день цикла
2) Трийодтиронин (Т3) общий
3) Трийодтиронин (Т3) свободный – 3-5 день цикла
4) Тироксин (Т4) общий
5) Титроксин (Т4) свободный – 3-5 день цикла
6) Яночкина (тиреоглобулин)
7) ТСГ (тироксин-связывающий белок)
8) Антитела к рецепторам ТТГ
Прочие гормоны
1) Инсулин
2) Проинсулин
3) АТ к инсулину
4) С-пептид
5) Кальцитонин
6) Остеокальцин
7) Паратгормон
8) 17-кетостероиды (моча) (17-КС)
9) 17-оксикетостероиды (моча) (17-ОКС)
10) Кортизол – 10 день цикла
Гормоны стресса: пролактин, кортизол, ЛГ – могут быть повышены не из-за гормональных заболеваний, а из-за хронического или острого (поход в больницу и сдача крови из вены) стресса. Их нужно пересдать.
Для диагноза «гиперпролактинемия», например, необходимо трехкратное измерение повышенного уровня пролактина.
Все гормоны сдают строго натощак, как и любые анализы крови!!!!
Если нет возможности сдать нужные гормоны в нужные дни цикла, лучше не сдавать вообще, чем сдавать в другие дни цикла. Анализ будет абсолютно неинформативным!!!!!
3. ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ
Полная иммунограмма: субпопуляции лимфоцитов + показатели гуморального иммунитета (уровни антител в крови) + показатели антимикробного иммунитета.
Аутоимунные антитела: образуются при развитии в организме аутоиммунных нарушений. Аутоиммунные реакции – это патологический ответ иммунной системы человека на компоненты собственных тканей организма – могут проявляться в выработке антител к фосфолипидам, фрагментам ДНК, факторам щитовидной железы и др. В акушерско-гинекологической практике подобные нарушения рассматриваются в рамках антифосфолипидного синдрома. Аутоантитела вызывают повышение свертывающей способности крови, развитие микротромбозов в сосудах плаценты, нарушение имплантации, маточно-плацентарную недостаточность, синдром внутриутробной задержки развития плода, гибель зародыша.
1) Антикардиолипин IgG, IgM. Антикардиолипиновые антитела (Anti-Cardiolipin Ab) обнаруживают в сыворотке больных с сердечно-сосудистой недостаточностью, при тромбоцитопениях, тромбозах, самопроизвольных выкидышах. Антикардиолипиновые антитела связываются с фосфолипидами эндотелиальных клеток кровеносных сосудов и миокарда. Образовавшийся комплекс аутоантител и кардиолипина приводит к распаду эндотелиальных клеток и, как следствие, к воспалительным реакциям. Это, в свою очередь, приводит к образованию тромбов. Присутствие β2-гликопротеина необходимо для связывания антикардиолипиновых антител с кардиолипином.
2) Антитела к денатурированной ДНК – отражают активность ревматоидного артрита, склеродермии, болезни Рейно, СКВ и др.
3) Антитела к двухспиральной, нативной ДНК (anti-dsDNA). Высокоспецифичный маркер системной красной волчанки.
4) Антитела к фосфолипидам (IgM, IgG). Важный диагностический критерий антифосфолипидного синдром (АФС).
5) Антиядерные антитела (АЯА, НЕр2 ANA), антинуклеарный фактор (АНФ). Один из распространенных скрининговых тестов, использующихся в диагностике аутоиммунных заболеваний.
6) Антитела к тиреоглобулину (АТ-Яночкина). Антитела к белку-предшественнику тиреоидных гормонов.
7) Антитела к тиреоидной пероксидазе (АТ-ТПО, микросомальные антитела).
8) Антиспермальные антитела.
9) Антитела к фактору роста нервов (АТ к ФРН) (Нейротест).
10) Антитела к хорионическому гонадотропину (факторы раннего невынашивания).
11) Антитела к 2-гликопртеину –I, IgG, IgM. (!!!) Обнаружение данных антител может быть сопряжено с высоким риском акушерской патологии (невынашивание беременности, внутриутробная гибель плода, бесплодие неясного генеза).
4. ГЕМОСТАЗИОГРАММА И КАУЛОГРАММА, ВКЛЮЧАЯ ВОЛЧАНОЧНЫЙ АНТИКОАГУЛЯНТ (ВА)
Гемостазиограмма – это оценка функционального состояния свертывающей системы крови (тромбоцитарное звено, плазменное звено). По этому исследованию можно судить о взаимоотношениях свертывающей и противосвертывающей системы крови, что очень важно в акушерско-гинекологической практике. Патология может проявляться как при активации свертывающей системы крови (тромбозы в сосудах всего организма матери, в сосудах плаценты), так и при активации противосвертывающей системы крови (кровотечения, преждевременная отслойка плаценты и т.д.).
Полная коагулограмма содержит очень большое число разных тестов, что не всегда реализуется , в том числе и по экономическим причинам. Выход из этой ситуации в использовании двухэтапного гемостазиологического обследования. Тесты первого этапа предназначены для выявления изменений в том или ином звене гемостаза.
Коагулограмма 1-го этапа включает:
1) протромбиновый тест – используется для общей характеристики внешнего пути свертывания крови;
2) определение АЧТВ – применяется для выявления суммарной активности факторов внутреннего пути образования фибрина;
3) определение количества тромбоцитов. Важно, чтобы этот тест выполнялся не только и не столько в общеклиническом анализе крови, а именно в составе коагулограммы 1-го этапа, поскольку это позволяет получить более цельную – диагностически и прогностически – картину состояния системы гемостаза;
4) определение концентрации фибриногена – дает информацию об основном коагуляционном субстрате;
5) определение тромбинового времени – характеризует конечный этап процесса свертывания крови, зависящий от содержания фибриногена и ингибиторов, блокирующих действие тромбина и превращение фибриногена в фибрин;
6) определение времени свертывания цельной крови – оценивает общий результат взаимодействия про- и антикоагулянтных систем и фибринолиза в данный конкретный момент времени;
7) определение величины гематокрита.
Перечисленные тесты позволяют получить достаточно общее представление о свертывающем и противосвертывающем потенциале крови пациента. Набор из этих семи тестов, являясь минимально необходимым для первичной диагностики, направлен на то, чтобы привлечь внимание специалиста к состоянию того или иного звена гемостаза. Вышеназванные тесты демонстрируют только следствия тех или иных нарушений свертывания крови. Поэтому именно коагулограмма 1-го этапа определяет набор тех методов, которые в дальнейшем предоставят всю необходимую информацию непосредственно о причинах гемостазиологических нарушений. Однако коагулограмму 1-го этапа возможно дополнить поиском гемокоагуляционных маркеров (1-2 метода), специфичных для определенной категории пациентов. В этом случае полученная информация (особенно в амбулаторных условиях) может оказаться достаточной для назначения терапии.
Коагулограмма второго этапа обследования предполагает более точную оценку про- и антикоагулянтных механизмов, а также характеристику фибринолитической активности. Более того, на этом этапе осуществляется поиск маркеров, свидетельствующих о наличии уже сформировавшихся тромбов и/или характеризующих активность ДВС крови.
Коагулограмма 2-го этапа должна содержать:
1) оценку агрегационной активности тромбоцитов – поскольку нарушение физической целостности или биохимического состояния участка эндотелия приводит к превращению атромбогенного сосуда в очаг тромбообразования через адгезию и агрегацию тромбоцитов и образование дополнительных порций тромбина;
2) исследование антикоагулянтной системы, прежде всего, по ее главным компонентам: антитромбину III, эндогенному гепарину. В тех случаях, когда необходимо расширить информацию о состоянии системы естественных антикоагулянтов могут быть выполнены исследования активности протеина С, протеина S и простагландина I2, что позволяет оценить активность реакций, естественно ингибирующих факторы VIIIа, Vа и агрегацию тромбоцитов;
3) определение общей фибринолитической активности крови – позволяет выявить суммарную напряженность реакций, борющихся с тромботическими осложнениями, определение Хаггеман-зависимого фибринолиза – характеризует уровень активации основных плазменных протеолитических систем и определение плазминогена –оценивает возможности фибринолитической системы;
4) определение маркеров внутрисосудистого свертывания крови: растворимых комплексов фибрин-мономера, продуктов деградации фибриногена (ПДФ), Д-димера;
5) определение специфических гемокоагуляционных маркеров, присущих данной категории пациентов: фактора Виллебранда, факторов VIII, IX и др.
5. СКЛ
СКЛ = смешанная культура лимфоцитов = MLC = mixed lymphocyte culture.
Этот тест состоит из набора культур, которые определяют степень распознавания супругами антигенов тканевой совместимости друг друга.
Лимфоцит — центральная клетка иммунной системы. Систему лимфоцитов можно сравнить с государством, где есть начальники и подчиненные, а каждый служащий выполняет специализированную функцию.
Если лимфоцит встречает любые чужеродные для организма объекты (бактерии, вирусы, чужие клетки и т. д.), то развивается иммунный ответ. Если речь идет о чужих тканях или клетках, то степень иммунного ответа будет зависеть от похожести конфигурации антигенов тканевой совместимости (HLA, human leucocyte antigens, или MHC, major histocompatibility complex, (это синонимы) антигенов).
Иммунный ответ выражается в появлении клонов (потомков одной клетки) клеток, строго специализированных к конкретным чужеродным факторам). Другими словами, если иммунные клетки начинают реагировать на что-то, они начинают делиться. А деление клеток можно оценить по скорости синтеза ДНК. Чем больше синтезируется ДНК — тем сильнее делятся клетки, тем активнее идет развитие иммунного ответа. Степень синтеза ДНК можно определить по включению в культуру клеток радиоактивного нуклеотида тимидина — “кирпичика” ДНК. На этом принципе основана оценка смешанной культуры лимфоцитов.
Технически это делается следующим образом. У супругов берут кровь, из которой выделяют лимфоциты. Эти лимфоциты помещают в благоприятную для деления питательную среду. Если смешать лимфоциты разных людей, они начнут друг на друга реагировать. Однако если просто зарегистрировать активность смешанной культуры разных людей, невозможно понять, как реагирует конкретный человек, потому что в бой вступают клетки всех участников смешанной культуры.
Для того, чтобы оценить индивидуальную реакцию каждого участника культуры, клетки одного из супругов подвергают воздействию, которое делает невозможным деление клеток. Однако антигенные свойства лимфоцитов при этом сохраняются. В такой культуре вся активность клеток будет связана только с живыми клетками другого супруга. Сравнивая различные комбинации культур живых и инактивированных клеток можно получить важную информацию о степени иммунологической похожести супругов.
Фактически в этом анализе, очень трудоемком, ставится 12 различных культур, а оценка реакции проводится на 3-и и 5-е сутки культуры.
Полученные 24 цифры позволяют получить важную информацию о том, как будет реагировать женщина на антигены тканевой совместимости мужа во время беременности.
Дело в том, что сохранение беременности — активный процесс. Так же, как при реакции отторжения, для развития иммунологической толерантности на первом этапе важно адекватное иммунологическое распознавание пришельца. Если это распознавание вялое, или если оно происходит слишком поздно, зародыш атакуется естественными клетками киллерами матери и погибает.
СКЛ позволяет не только оценить состояние иммунологического распознавания лимфоцитов супругов друг другом, но и проконтролировать процесс лечения с помощью иммунизации лимфоцитами, выбрать метод и дозу иммунизации, оценить перспективы применения того или иного способа коррекции.
Поэтому при обнаружении “плохой” конфигурации цифр в СКЛ, часто приходится ее повторять уже после лечебных воздействий.
6. ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ
Анализ позволяет определить наличие или отсутствие патогенных микроорганизмов, вирусов, в некоторых случаях произвести типирование на патогенные и непатогенные биоварианты.
Урогенитальная инфекция может стать причиной развития острых и хронических воспалительных заболеваний органов малого таза, бесплодия и невынашивания беременности, патологических изменений эпителия шейки матки (эрозия, дисплазия).
7. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИТЕЛ К ВИРУСАМ, БАКТЕРИЯМ, ПРОСТЕЙШИМ В КРОВИ
-IgG, IgM к герпесу
-IgG, IgM к цитомегаловирусу (ЦМВ)
-IgG, IgM к токсоплазмам
-IgG, IgM к краснухе
-IgG, IgM к хламидиям
Наличие антител IgG означает иммунитет к этим инфекциям, и не является препятствием к беременности.
Наличие IgM означает острую стадию, планирование в этом случае необходимо отложить до выздоровления.
Если к краснухе нет антител IgG, необходимо сделать прививку и после нее предохраняться еще 3 месяца. Не спрашивайте своих родителей, болели ли Вы краснухой, точно знать это невозможно – она может протекать под маской ОРЗ и наоборот. Точную информацию может дать только анализ крови на антитела.
8. РАННЯЯ ДИАГНОСТИКА ПРЕДРАКОВЫХ ПРОЦЕССОВ ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ
1) Мазок по Папаниколау
2) Мазок из полости матки для цитологического обследования (Утеробраш)
3) Биопсия эндометрия (Пайпель)
4) Расширенная кольпоскопия
9. ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
1) Определение кариотипа.
2) HLA- типирование.
Это исследование крови, определяющее, насколько супруги сходны или различимы по антигенам (белкам) тканевой совместимости. При нормальной беременности белки клеток трофобласта, унаследованные от отца, посылают сигнал в организм матери, запускающий защитную реакцию вокруг зародыша. Если зародыш иммунологически похож на организм матери, своевременое распознавание беременности нарушается. В таком случае организм матери может отторгнуть зародыш.
Проводится типирование по нескольким показателям тканевой совместимости.
3) Диагностика наследственного полиморфизма системы гемостаза и гипергмоцистеинемии.
1. Мутации системы гемостаза – 3 фактора:
– лейденская мутация (мутация фактора V);
– мутация гена протромбина;
– мутация MTHFR.
Исследования последних лет показали, что у пациенток с привычным невынашиванием беременности часто обнаруживают один или несколько генетических факторов тромбофилии.
Тромбофилия – склонность к развитию тромбозов. Может быть наследственная и ненаследственная. Наличие тромбофилии сопряжено с повышенным риском развития осложнений беременности (привычное невынашивание, плацентарная недостаточность, задержка роста плода, поздний токсикоз (гестоз)).
К числу генных маркеров наследственных тромбофилий относятся: мутация метилентетрагидрафолатредуктазы, лейденская мутация, мутация гена протромбина.
2. Гомоцистеин – продукт метаболизма метионина – одной из 8 незаменимых аминокислот организма. В норме он не накапливается. Обладает выраженным токсическим действием на клетку. Циркулируя в крови, повреждает сосуды, тем самым повышая свертываемость крови, образование микротромбов в сосудах (одна из причин невынашивания беременности).
Основной фермент дальнейшего метаболизма гомоцистеина – метилентетрагидрафолатредуктаза. Снижение активности этого фермента – одна из важных причин накопления гомоцистеина в крови.
10. ГИСТЕРОСКОПИЯ/ МИНИГИСТЕРОСКОПИЯ
Минигистероскопию врачи, делающие ЭКО, обычно назначают по следующим показаниям: несколько безуспешных переносов эмбрионов отличного качества на хороший по всем УЗИ-признакам эндометрий.
Минигистероскопия позволяет исключить следующие причины отсутствия имплантации идеальных эмбрионов (6-8 клеточных на третьи сутки, без фрагментации):
1. Невидимые на УЗИ внутриматочные синехии (сращения внутри полости матки – результат перенесенного воспалительного процесса в эндометрии, или грубого выскабливания полости матки).
2. Мелкие полипы (меньше 2 мм), также не видимые на УЗИ. Множественные мелкие полипы чаще всего также являются результатом воспалительного процесса.
Минигистероскопию (офисную гистероскопию) делают гистероскопами такого маленького диаметра (2,5 мм), что данная операция происходит БЕЗ РАСШИРЕНИЯ КАНАЛА ШЕЙКИ МАТКИ, без болевых ощущений ВООБЩЕ (то есть НИКАКАЯ анестезия вообще не требуется).
Единственный ее минус – если во время операции минигистероскопии обнаруживают показания к проведению диагностического выскабливания, то врачам необходимо будет перейти к обычной операции раздельного диагностического выскабливания. Для этого минигистероскоп удалят из полости матки, пациенке дадут наркоз, и затем уже будут расширять канал шейки матки до диаметра 8-9 мм для введения обычного (не мини) гистероскопа (7,5 мм) и проведения операции. Поэтому, если конкретно в Вашем случае вероятность перехода от минигистероскопии к обычной гистероскопии не исключают, то в день операции не надо ничего есть и пить. Но такая необходимость возникает не часто, так как признаки эндометрита, гиперпролиферации эндометрия, полипы ( крупнее 2 мм) хорошо видны на УЗИ, и пациентке сразу назначается обычная лечебная гистероскопия.
Перед операцией гистероскопии обязательно договоритесь с врачом о том, что, если возникнет хоть малейшее подозрение на имеющийся у вас эндометрит, чтобы был сделан посев с чувствительностью микрофлоры к антибиотикам. В этом случае последующее лечение будет наиболее эффективно.
Источник