Проточная цитометрия лимфоциты в крови
Cтоимость анализов указана без учета взятия биоматериала
Метод определения
Субпопуляции лимфоцитов – иммунофенотипирование (проточная цитометрия).
Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)
Оценка состояния различных звеньев иммунитета, используемая в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитов, аутоиммунных, лимфопролиферативных, инфекционных, гематологических заболеваний.
В состав профиля входят следующие показатели:
- Базофилы
- B-лимфоциты (CD3-19+), %
- B-лимфоциты (CD3-19+)
- T-лимфоц. (CD3+25+), %
- T-лимфоц. (CD3+25+)
- T-лимф. (CD3+19-), %
- T-лимф. (CD3+19-)
- T- хелперы (CD3+4+), %
- CD4/CD8 (иммунорег.индекс)
- T-хелперы (CD3+4+)
- T- цитотокс. (CD3+8+), %
- T-цитотокс. (CD3+8+)
- Эозинофилы
- Т-лимф.(CD3+HLA DR+), %
- Т-лимф.(CD3+HLA DR+)
- Лимфоциты, %
- Лимфоциты
- Моноциты, %
- Моноциты
- Нейтрофилы (общ.число)
- NK-лимф.(CD3-16+56+), %
- NK-лимф.(CD16+56+11b+), %
- NK-лимф.(CD16+56+11b+)
- NK-лимф.(CD3-16+56+)
- T-NK-лимф.(CD3+16+56+), %
- T-NK-лимф.(CD3+16+56+)
- Лейкоциты
Основные субпопуляции лимфоцитов:
Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ. Т-хелперы, Th (от англ. to help – помогать) – разновидность Т-лимфоцитов, несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками, участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины. Цитотоксические Т-клетки – распознают фрагменты антигена, на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.
В-лимфоциты (от лат. «bursa» – сумка по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.
ЕК-клетки (естественные клетки-киллеры) или натуральные киллеры-клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням, которые не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. Т-ЕК-клетки (ЕКТ) – клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.
Активированные лимфоциты.
HLA-DR – один из антигенов MHC класса II (major histocompatibility complex – главный комплекс гистосовместимости), участвующих в презентации потенциально чужеродных антигенов, что необходимо для формирования адекватного иммунного ответа. При иммунофенотипировании может быть использован в качестве маркёра активированных клеток. CD3+HLA-DR+ – клетки, представляющие собой зрелые активированные Т-лимфоциты человека. CD3-HLA-DR+ – активированные клетки, не относящиеся к Т-лимфоцитам (В-лимфоциты и активированные ЕК).
Способность лимфоцитов к активации.
Способность лимфоцитов к активации в данном тесте оценивают по содержанию лимфоцитов, экспрессирующих CD69 в ответ на инкубацию в присутствии ФГА (митоген растительного происхождения). CD69 (другие названия – activation inducer molecule, AIM; early activation antigen, EA-1) – ранний маркёр активации, трансмембранный белок типа I. Этот белок вовлечен в ранние механизмы активации Т-клеток, ЕК-клеток, В-клеток, моноцитов и тромбоцитов.
Фагоцитарная активность лейкоцитов.
Данные по фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов (относительное содержание клеток, фагоцитировавших добавленные к пробе при инкубации меченые флюоресцентной меткой бактерии) позволяют оценить резервные возможности этих клеток по поглощению и перевариванию чужеродных агентов.
Циркулирующие иммунные комплексы общие (ЦИК)
Одновременное присутствие высоких концентраций антигенов и их специфических антител может вести к образованию циркулирующих иммунных комплексов. Иммунные комплексы могут выходить из кровотока в мелких сосудах и откладываться в тканях, например, в гломерулах почек, в лёгких, коже, суставах, стенке сосудов. ЦИК обладают способностью связывать и активировать комплемент, что ведёт к повреждению ткани. Повышение уровня ЦИК может наблюдаться при аутоиммунных заболеваниях, хронических инфекционных заболеваниях, при которых постоянная продукция антигена инфекционным агентом сочетается с иммунным ответом на него (хронические гепатиты). Клинически это часто проявляется гломерулонефритами, артритами, нейропатиями. Несмотря на непосредственную роль в патогенезе некоторых заболеваний, определение ЦИК не всегда информативно, поскольку количество иммунных комплексов, отложившихся в тканях более важно, чем количество комплексов, циркулирующих в крови. Исследование ЦИК может быть недостаточно чувствительным и специфичным в диагностике болезней, вызываемых иммунными комплексами, и должно дополняться исследованием эффектов ЦИК на функцию органов (например, концентрация креатинина и анализ мочи), а также определением С3 С4 компонентов комплемента (см. тест № 193), количество которых снижается вследствие усиленного потребления.
Иммуноглобулины. См. информацию.к тестам Иммуноглобулины IgG, IgA, IgM, – №№ 45, 46, 47.
Данные иммунологического исследования интерпретирует врач-иммунолог в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента. При оценке иммунного статуса пациента результаты исследования оценивают с точки зрения природы и стадии патологического процесса, сопутствующих заболеваний, приёма лекарственных препаратов и пр. При этом важны не только абсолютные значения отдельных показателей, но и их соотношение и динамика показателей. Изменения иммунологических показателей могут быть проявлением нормальной реакции организма на воздействие физиологических или патологических факторов (с различной картиной сдвигов на разных стадиях заболевания), отражать чрезмерную активацию, истощение иммунной системы, характеризовать врождённый или приобретённый дефект отдельных звеньев иммунной системы.
Литература
- Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. – Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с.
- Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. – М.: Практика, 2000. – 806 с.
- Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с.
- Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ – Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 – 432 с.
- Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. – М.: Мир, 2000 — 592 с
- Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 – 752 с.
- Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013.
- Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 – 1798 p.
Строго натощак (в период с 7.00 до 11.00) после ночного периода голодания от 8 до 14 часов.
Накануне исследования необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя, за час до исследования – курение.
- Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
- Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.
- Аутоиммунные заболевания.
- Аллергические заболевания.
- Подозрение на синдром приобретённого иммунодефицита (СПИД).
- Онкологические заболевания.
- Обследование реципиентов до и после трансплантации органов.
- Обследование пациентов перед серьёзными оперативными вмешательствами.
- Осложнённое течение послеоперационного периода.
- Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Данные иммунологического исследования интерпретирует врач в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента. При оценке иммунного статуса пациента результаты исследования оценивают с точки зрения природы и стадии патологического процесса, сопутствующих заболеваний, приёма лекарственных препаратов и пр. При этом важны не только абсолютные значения отдельных показателей, но и их соотношение и динамика показателей.
| Название теста | Пол | Возраст | Референсные значения | Единицы измерения |
| Базофилы | Мужской и Женский | 1 день – 120 лет | 0,0 – 1,0 | % |
| В-лимфоциты (CD3-19+),% | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 11 – 45 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 21 – 28 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 21 – 28 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 7 – 17 | ||
| В-лимфоциты (CD3-19+) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 387 – 2137 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 740 – 1330 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 700 – 1300 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 7 – 17 | ||
| Т-лимфоц. (CD3+25+), % | Мужской и Женский | 2 дня – 12 меясцев | 7 – 18 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 7 – 18 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 7 – 18 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 7 – 18 | ||
| Т-лимфоц. (CD3+25+) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 60 – 400 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 60 – 400 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 60 – 400 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 60 – 400 | ||
| Т-лимф. (CD3+19-), % | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 55 – 82 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 62 – 69 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 66 – 76 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 61 – 85 | ||
| Т-лимф. (CD3+19-) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 1614 – 3577 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 1820 – 3010 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 1400 – 2000 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 946 – 2079 | ||
| Т-хелперы (CD3+4+),% | Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 35 – 55 | % |
| CD4/CD8 (иммунорег. индекс) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 1,8 – 2,2 | у.е. |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 1,0 – 2,0 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 1,0 – 2,0 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 1,8 – 2,2 | ||
| Т-хелперы (CD3+4+) | Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 576 – 1336 | кл/мкл |
| Т-цитокс. (CD3+8+),% | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 8 – 31 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 25 – 32 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 27 – 35 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 19 – 35 | ||
| Т-цитокс. (CD3+8+) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 259 – 1470 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 810 – 1520 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 600 – 900 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 372 – 974 | ||
| Эозинофилы | Мужской и Женский | 1 день – 15 дней | 1,0 – 6,0 | % |
| Мужской и Женский | 15 дней – 12 месяцев | 1,0 – 5,0 | ||
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 1,0 – 7,0 | ||
| Т-лимф. (CD3+HLA DR+), % | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 1 – 6 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 1 – 6 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 1 – 6 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 1 – 6 | ||
| Т-лимф. (CD3+HLA DR+) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 7 – 163 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 7 – 163 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 7 – 163 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 7 – 163 | ||
| Лимфоциты, % | Мужской и Женский | 1 день – 15 дней | 22,0 – 55,0 | % |
| Мужской и Женский | 15 дней – 12 месяцев | 45,0 – 70,0 | ||
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 37,0 – 60,0 | ||
| Мужской и Женский | 2 года – 5 лет | 33,0 – 55,0 | ||
| Мужской и Женский | 5 лет – 9 лет | 30,0 – 50,0 | ||
| Мужской и Женский | 9 лет – 12 лет | 30,0 – 46,0 | ||
| Мужской и Женский | 12 лет – 15 лет | 30,0 – 45,0 | ||
| Мужской и Женский | 15 лет – 120 лет | 19,0 – 37,0 | ||
| Лимфоциты | Мужской и Женский | 1 день – 2 дня | 1,60 – 7,40 | 10^9/л |
| Мужской и Женский | 2 дня – 5 дней | 1,60 – 6,0 | ||
| Мужской и Женский | 5 дней – 28 дней | 2,80 – 9,00 | ||
| Мужской и Женский | 28 дней – 6 месяцев | 4,00 – 13,50 | ||
| Мужской и Женский | 6 месяцев – 12 месяцев | 4,00 – 10,50 | ||
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 3,00 – 9,50 | ||
| Мужской и Женский | 2 года – 4 года | 2,00 – 8,00 | ||
| Мужской и Женский | 4 года – 6 лет | 1,50 – 7,00 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 10 лет | 1,50 – 6,50 | ||
| Мужской и Женский | 10 лет – 21 год | 1,00 – 4,80 | ||
| Женский | 21 год – 120 лет | 1,18 – 3,74 | ||
| Мужской | 21 год – 120 лет | 1,32 – 3,57 | ||
| Моноциты, % | Мужской и Женский | 1 день – 15 дней | 5,0 – 15,0 | % |
| Мужской и Женский | 15 дней- 12 месяцев | 4,0 – 10,0 | ||
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 3,0 – 10,0 | ||
| Мужской и Женский | 2 года – 15 лет | 3,0 – 9,0 | ||
| Мужской и Женский | 15 лет – 120 лет | 3,0 – 11,0 | ||
| Моноциты | Мужской и Женский | 1 день – 2 дня | 0,00 – 2,00 | 10^9/л |
| Мужской и Женский | 2 дня – 28 дней | 0,00 – 1,70 | ||
| Мужской и Женский | 28 дней – 6 месяцев | 0,00 – 1,17 | ||
| Мужской и Женский | 6 месяцев – 12 месяцев | 0,00 – 1,15 | ||
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 0,00 – 1,00 | ||
| Мужской и Женский | 2 года – 21 год | 0,00 – 0,80 | ||
| Мужской и Женский | 21 год – 120 лет | 0,20 – 0,95 | ||
| Нейтрофилы (общ.число) | Мужской и Женский | 0 дней – 15 дней | 31,0 – 56,0 | % |
| Мужской и Женский | 15 дней – 12 месяцев | 17,0 – 51,0 | ||
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 29,0 – 54,0 | ||
| Мужской и Женский | 2 года – 5 лет | 33,0 – 61,0 | ||
| Мужской и Женский | 5 лет – 7 лет | 39,0 – 64,0 | ||
| Мужской и Женский | 7 лет – 9 лет | 42,0 – 66,0 | ||
| Мужской и Женский | 9 лет – 11 лет | 44,0 – 66,0 | ||
| Мужской и Женский | 11 лет – 15 лет | 46,0 – 66,0 | ||
| Мужской и Женский | 15 лет – 120 лет | 48,0 – 78,0 | ||
| NK-лимф. (CD3-16+56+), % | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 9 – 21 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 8 – 15 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 8 – 15 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 9 – 21 | ||
| NK-лимф. (CD3-16+56+) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 123 – 369 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 210 – 640 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 200 – 600 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 123 – 369 | ||
| T-NK-лимф. (CD3+16+56+), % | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 1 – 6 | % |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 1 – 6 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 1 – 6 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 1 – 6 | ||
| T-NK-лимф. (CD3+16+56+) | Мужской и Женский | 2 дня – 12 месяцев | 7-165 | кл/мкл |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 6 лет | 7-165 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 17 лет | 7-165 | ||
| Мужской и Женский | 17 лет – 120 лет | 7-165 | ||
| Лейкоциты | Мужской и Женский | 1 день – 12 месяцев | 6,00 – 17,50 | 10^9/л |
| Мужской и Женский | 12 месяцев – 2 года | 6,00 – 17,00 | ||
| Мужской и Женский | 2 года – 4 года | 5,50 – 15,50 | ||
| Мужской и Женский | 4 года – 6 лет | 5,00 – 14,50 | ||
| Мужской и Женский | 6 лет – 10 лет | 4,50 – 13,50 | ||
| Мужской и Женский | 10 лет – 16 лет | 4,50 – 13,00 | ||
| Мужской и Женский | 16 лет – 120 лет | 4,50 – 11,0 |
Артикул:
31414Ф
Срок исполнения:
до 3 рабочих дней ?
Указанный срок не включает день взятия биоматериала
Цена:
3 620 руб
Взятие крови из вены:
- + 165 руб
В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Определение различных популяций лимфоцитов, основные+определение маркеров активации (CD-типирование методом проточной цитометрии)» в Каслях и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.
Источник
Текущая версия страницы пока не проверялась опытными участниками и может значительно отличаться от версии, проверенной 28 марта 2018; проверки требуют 7 правок.
Схема оборудования для проведения проточной цитометрии.
Проточная цитометрия (проточная цитофлуориметрия) — метод исследования дисперсных сред в режиме поштучного анализа элементов дисперсной фазы по сигналам светорассеяния и флуоресценции. Название метода связано с основным приложением, а именно, с исследованием одиночных биологических клеток в потоке.
Основа метода заключается в 1) использовании системы гидрофокусировки, которая обеспечивает прохождение клеток в потоке поодиночке; 2) облучении клетки лазерным излучением; 3) регистрации сигналов светорассеяния и флуоресценции от каждой клетки.
Кроме того, в ходе анализа учитывается уровень флуоресценции химических соединений, входящих в состав клетки (аутофлуоресценция) или внесённых в образец перед проведением проточной цитометрии.
Образцы[править | править код]
- кровь
- костный мозг
- ликвор
- суставная жидкость
- плевральная жидкость
- асцитическая жидкость
- суспендированные клетки тканей (например, опухолей)
Принцип[править | править код]
Принцип работы гидрофокусирующей системы
Клеточная суспензия, предварительно меченная флюоресцирующими моноклональными антителами или флуоресцентными красителями, попадает в поток жидкости, проходящий через проточную ячейку. Условия подобраны таким образом, что клетки выстраиваются друг за другом за счет т. н. гидродинамического фокусирования струи в струе. Гидродинамическая фокусировка обеспечивается большим удельным расходом во внешней струе (струя-оболочка) по сравнению с удельным расходом пробы. Схематически принцип работы показан на видео. При увеличении удельного расхода во внешней струе, клетки выстраиваются в линию, одна за другой.
В момент пересечения клеткой лазерного луча детекторы фиксируют:
- рассеяние света под малыми углами (от 1° до 10°).
- рассеяние света под углом 90°.
- интенсивность флуоресценции по нескольким каналам флуоресцентности (от 2 до 18-20).
Интенсивность рассеяния зависит от морфологии клетки (размер, форма, внутренняя структура), от ориентации клетки в потоке относительно направления падающего излучения, от состояния поляризации падающего излучения.
Интенсивность флуоресценции формируется за счет двух вкладов: специфической флуоресценции и автофлуоресценции. Специфическая флуоресценция связана с излучением молекул флуорохрома, специфически связанных с определенными клеточными компонентами (рецепторы, внутриклеточные белки, ДНК и др.). Автофлуоресценция связана с излучением собственных молекул клетки (белки, нуклеиновые кислоты и т.д.). Интенсивность специфической флуоресценции зависит от количества молекул флуорохрома в клетке, длины волны возбуждающего излучения, сечения поглощения (экстинкции) флуорохрома на этой длине волны, квантового выхода флуорохрома, числовой апертуры оптической системы сбора флуоресценции, спектрального диапазона системы оптической фильтрации и детекции. Интенсивность автофлуоресценции аналогичным образом зависит от оптических свойств собственных молекул клетки. На практике подготовка клеток перед измерением осуществляется таким образом, чтобы вклад специфической флуоресценции на несколько порядков превышал вклад автофлуоресценции.
Приборы[править | править код]
Приборы для анализа клеток методом проточной цитометрии называются проточными цитометрами, или проточными цитофлуориметрами. Самыми популярными на территории России и СНГ проточными цитометрами являются приборы компаний Beckman Coulter Life Sciences[1] и BD Biosciences.
Флуорохромы[править | править код]
- Флуоресцеина изотиоцианат (FITC)
- Фикоэритрин (PE, RD1)
- Перидинин-Хлорофилл Протеин (Per-CP)
- Алофикоцианин (APC)
Тандемные красители:
- Фикоэритрин — Техасский красный (ECD)
- Фикоэритрин — Cy5 (PC5)
- Фикоэритрин — Cy7 (PC7)
- Аллофикоцианин- Cy7 (APC-Cy7)
«Квантовые точки»
QD560, QD590 и т. д.
Преимущества[править | править код]
- короткое время анализа за счет высокой скорости (до 100 000 событий в секунду)
- анализ большого количества клеток (до 108 клеток в мл)
- определение субпопуляций клеток
- измерение параметров редко встречающихся клеток
- объективное измерение интенсивности флуоресценции
Применение[править | править код]
Иммунология[править | править код]
- иммунофенотипирование клеток периферической крови
- определение фагоцитарной активности (захват меченных флюорохромами бактерий или дрожжей)
- определение внутриклеточных цитокинов (спонтанная продукция и под действием различных специфических или неспецифических активаторов, таких как ФМА + иономицин, ЛПС, ФНО-альфа)
- определение внутриклеточных белков, например транскрипционных факторов GATA-3, T-bet, FoxP3 для дискриминации CD4 Т-лимфоцитов
- определение пролиферативной активности (выявление инкорпорированого бромдезоксиуридина)
- исследование клеточного цикла
- оценка клеточной цитотоксичности
Онкология[править | править код]
- количественный анализ внутриклеточных компонентов (ДНК)
- анализ стадий клеточного цикла
- выявление анеуплоидного клона
- определение пролиферативной активности анеуплоидного клона
- определение специфических маркеров
- позволяет проводить наблюдение пациентов, входящих в группу риска
- оценка состояния иммунной системы:
- оценка клеточного звена иммунитета (определение субпопуляций лимфоцитов)
- оценка функциональной состоятельности иммунокомпетентных клеток (NK тест, фагоцитарный тест и т. п.)
Цитология[править | править код]
- определение цитоморфологической принадлежности клетки размер, соотношение ядро/цитоплазма, степень асимметричности и гранулярности клеток
- оценка активности внутриклеточных ферментов с помощью флуорогенных субстратов
- определение экспрессии поверхностных антигенов
- анализ стадий клеточного цикла
- измерение физиологических параметров клетки (внутриклеточный pH, концентрация свободных ионов Ca2+, потенциал наружной клеточной мембраны)
Гематология[править | править код]
- анализ субпопуляционного состава клеток периферической крови
- подсчет ретикулоцитов, анализ тромбоцитов по специфическим маркерам
- дифференциальная диагностика лимфопролиферативных заболеваний и реактивных лимфоцитозов
- диагностика лимфопролиферативных заболеваний
- диагностика острых лейкозов
- оценка минимальной резидуальной болезни
Фармакология[править | править код]
- измерение экспрессии маркеров
- измерение активности внутриклеточных ферментов
- определений стадий клеточного цикла в рамках изучения механизмов воздействия различных биологически активных веществ на клеточном уровне
Растениеводство / Сельское хозяйство[править | править код]
- определение плоидности клеток
- анализ клеточного цикла
- анализ и сортировка протопластов
Литература[править | править код]
- Davey H. Flow cytometry for clinical microbiology. CLI 2004; 2/3:12-5.
- Shapiro H.M. «Practical Flow Cytometry», Alan Liss, .N.Y., 1985.
- ↑ Проточные цитометры и клеточные сортеры – Beckman Coulter. www.mybeckman.ru. Дата обращения: 16 декабря 2020.
Источник