Лимфоциты в периферической крови
[20-077]
Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD56
4035 руб.
Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD56). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.
Синонимы русские
Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, субпопуляции лимфоцитов.
Синонимы английские
Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.
Метод исследования
Проточная цитометрия.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
- Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
- Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
- Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
- Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
- Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлуориметрии.
Иммунофенотипирование – характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.
Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.
В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.
Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:
- Т-лимфоциты (CD3+CD19-);
- Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+);
- Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+);
- истинные “натуральные киллеры” (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+);
- В-лимфоциты (CD19+CD3-);
– но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:
- Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток(Т-NK-клетки) (CD3+CD56+CD45+);
- NK-клетки, экспрессирующие α-цепь антигена CD8 (CD3-СD8+CD45+).
Когда назначается исследование?
Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.
С инфекционным синдромом:
- частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
- бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
- урогенитальные инфекции;
- грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
- рецидивирующий герпес различной локализации;
- гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
- длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
- генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты.
С аллергическим (атопическим) синдромом:
- атопический дерматит;
- нейродермит;
- экзема с инфекционным компонентом;
- тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.
С аутоиммунным синдромом:
- ревматоидный артрит;
- рассеянный склероз;
- диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
- аутоиммунный тиреоидит;
- неспецифический язвенный колит.
С иммунопролиферативным синдромом:
- опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).
Что означают результаты?
Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.
Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.
Субпопуляция лимфоцитов | Повышение показателя | Снижение показателя |
T-лимфоциты (CD3+CD19-) |
|
|
Т-хелперы (CD3+CD4+CD45+) |
|
|
Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+) |
|
|
В-лимфоциты (CD19+CD3-) |
|
|
“Натуральные киллеры” (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+) |
|
|
Т-“натуральные киллеры”, НК-Т (CD3+CD56+CD45+) |
| Не имеет диагностического значения. |
В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.
Важные замечания
- Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
- Следует отметить, что оценка показателей в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.
Литература
- Хаитов, Р.М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р.М. Хаитова, Н.И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
- Хаитов, Р.М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
- Зуева Е.Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе /Е.Е Зуева, Е.Б. Русанова, А.В. Куртова, А.П. Рыжак, М.В. горчакова, О.В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО «издательство «Триада», 2008. – 60 с.
- Кетлинский, С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А.А. Иммунология : учебник / А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
- Хаитов, Р.М. Иммунология : атлас / Р.М. Хаитов, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
- Хаитов, Р.М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
- Хаитов, Р.М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4–6.
- Whiteside, T.L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T.L. Whiteside, R.B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125–133.
- Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539–544.
- Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337–1343.
- Никитин, В.Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотокси ческих лимфоцитахна различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В.Ю. Никитин, И.А. Сухина, В.Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65–71.
- Boettler, T. T cells with CD4+CD25+ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8+ T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. − 2005. − Vol. 79, N 12. −P. 7860–7867.
- Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. − 2005. − Vol. 65, N 6. − P. 2457–2464.
- Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4+CD25+ regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. − 2005. −Vol. 6, N 4. − P. 345–352.
- Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. – 2006. − Vol. 36. − P. 1357–1366.
- Хайдуков С.В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека и их нормативные значения (метод многоцветного цитометрического анализа) /Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян А.А., Черешнев В.А. // Мед. иммунология. – 2009. -Т. 11 (2-3). – С. 227-238.
Источник
Лимфоциты – это кровяные тельца, представляющие собой разновидность лейкоцитов, основной задачей которых является обеспечение гуморального и клеточного иммунитета. Отличием от других кровяных клеток является то, что лимфоциты борются не только с чужеродной патогенной микрофлорой, но и с собственными клетками организма, которые претерпели различные мутации, злокачественное перерождение и т. д. Поэтому от количества данных клеток в крови зависит очень многое. Какая норма лимфоцитов должна быть?
Норма лимфоцитов по возрасту и полу
Лимфоциты нередко называют основными компонентами иммунной системы. Данные клетки осуществляют поддержку генетического постоянства гомеостаза, отличая нормальные клетки организмов от мутировавших.
Посредством лимфоцитов решается целый ряд задач в организме:
- синтез антител;
- стимуляция иммунной памяти;
- выявление собственных мутировавших клеток с последующим их уничтожением;
- лизирование (уничтожение) чужеродных клеток.
Существуют у лимфоцитов и негативные функции. К примеру, отторжение трансплантатов возникает именно по вине этих клеток.
Лимфоциты не все одинаковы, их можно разделить на три группы согласно выполняемым функциям:
- Т-клетки. Самая многочисленная группа, которая составляет около 75% от всех лимфоцитов. Задачей представителей данной группы является выявление микробов и вирусов, их нейтрализация и обеспечение клеточного иммунитета.
- В-клетки. Синтезируются в селезенке и костном мозге, после чего попадают в лимфоузлы. Отвечают за гуморальный иммунитет и составляют вторую по численности группу лимфоцитов (около 15%).
- НК-клетки. Задачей этих кровяных телец является защита организма от онкологически мутировавших и пораженных вирусами клеток.
Норма лимфоцитов у детей
Несмотря на то, что расшифровкой анализов должен заниматься исключительно специалист, некоторые родители стремятся самостоятельно разобраться в тонкостях данного процесса. Чтобы понять, повышен или понижен уровень лимфоцитов у ребенка, необходимо знать нормальные показатели.
В период с 1 до 6 лет нормой лимфоцитов считаются от 25 до 60%
Поскольку детский организм постоянно растет и развивается, то и норма лимфоцитов изменяется в результате подобных перестроек.
Рассмотрим усредненные показатели количества лимфоцитов в зависимости от возраста ребенка:
- Для новорожденного нормой лимфоцитов в крови считается содержание в пределах 12-36%.
- Когда ребенок достигает месячного возраста, количество лимфоцитов в его организме увеличивается в несколько раз. Это объясняется усиленной работой иммунной системы. Количество лимфоцитов в этот период составляет 39-75%.
- Для полугодовалых малышей показатели остаются практически неизменными и составляют 43-73%. Лимфоциты 52% в данном случае считаются идеальным параметром.
- Когда ребенок достигает возраста 1 год, нормальные показатели еще немного снижаются и составляют 38-72%.
- В период с 1 до 6 лет нормой считаются показатели от 25 до 60%.
- Норма лимфоцитов в крови с 7 до 12 лет – 23-53%.
- Уровень лимфоцитов в крови ребенка в возрасте 12-15 лет составляет от 20 до 48%.
Значительное отклонение от представленных выше данных в любую сторону может быть следствием развития в организме малыша опасных изменений.
К примеру, довольно частыми причинами лимфоцитоза являются брюшной тиф, туберкулез и заболевания эндокринного характера. Пониженный уровень лимфоцитов отмечается при частых стрессах, инфаркте, СПИДе, а также в качестве последствия курса химиотерапии.
Количество лимфоцитов в крови позволяет установить точный диагноз. Это особенно важно при обследовании детей, ведь далеко не каждый ребенок может правильно описать свои ощущения, вызванные недугом.
Норма у женщин
Количество лимфоцитов в крови у женщин зависит от возраста:
- В 30 лет средние показатели составляют от 20 до 40%. Лимфоциты 40% считаются своеобразным стандартом для мужчин, не достигших 55-летия. В случае беременности количество иммунных клеток в женском организме снижается. Причиной этому является соответствующая перестройка организма, что следует учитывать при сдаче анализов.
- В 40 лет. Содержание лимфоцитов в крови в этот период остается практически неизменным и составляет 18-37%. Ввиду того, что женщины после 40 подвержены менопаузе, здесь тоже возможны определенные отклонения от нормы.
- После 50 лет. Уровень лимфоцитов падает, составляя 17-20%. В этом возрасте развивается менопауза, происходит гормональная перестройка, и организм нередко страдает от развития всевозможных патологических процессов.
- После 60 лет количество лимфоцитов составляет менее 18%. Лимфоциты выше этого показателя практически не встречаются. По этой причине многие женщины в возрасте принимают лекарственные средства, которые оказывают тонизирующее влияние на иммунные клетки.
Норма у мужчин
Как и у женщин, качество и количество лимфоцитов в мужском организме определяется, в первую очередь, возрастом мужчины. После достижения тридцатилетия в организме мужчины прекращается естественный синтез Т-лимфоцитов. В результате этого реакция иммунитета может становиться непрогнозируемой, когда организм утрачивает способность адекватно реагировать на патогенную микрофлору.
Если же клеточного сбоя не произошло, то количество лимфоцитов после 30 лет приходит в норму. В процентном соотношении оно составляет 24-39%. После 65 лет наблюдается угнетение работы иммунной системы. Лимфоциты снижены – средний показатель составляет от 20 до 36%.
Следует понимать, что нежелательным является как повышение, так и понижение уровня кровяных телец. В первом случае можно говорить о гиперпродукции вилочковой железы. Это свидетельствует о нарушениях ее функций. Пониженное же содержание лимфоцитов говорит об ослаблении иммунной системы. Поэтому оба варианта требуют проведения направленного лечения.
Кроме того, у здоровых мужчин может происходить изменение количества лимфоцитов в крови на фоне следующих состояний:
- стрессовые ситуации;
- повышенная физическая нагрузка (в этом случае отклонение от средних показателей является временным);
- злоупотребление курением – сигареты провоцируют высокие лимфоциты.
Пониженные лимфоциты
Низкий уровень лимфоцитов может свидетельствовать о развитии ряда заболеваний или патологических состояний или являться индивидуальной особенностью человека. Такое состояние называется лимфоцитопенией или лимфопенией.
В медицинской практике различаются две разновидности заболевания:
- Относительная лимфопения (уменьшается процентное содержание лимфоцитов среди всех лейкоцитов, в то время как количество их может оставаться неизмененным). Лимфоциты гибнут очень быстро, что приводит к нарушениям в развитии лимфатической системы. Возникает в результате острых или хронических инфекционных заболеваний.
- Абсолютная лимфопения (уменьшается количество лимфоцитов). Проявляется на фоне врожденного или приобретенного дефицита иммунных сил организма. Проявляется у больных нейтрофилезом, лейкозом, лейкоцитозом, а также в результате воздействия радиации.
Пониженные лимфоциты могут сигнализировать о развитии целого ряда заболеваний
Причины
Стандартный показатель количества лимфоцитов в 20-40% для взрослого человека может падать по различным причинам. Их довольно много, а потому бывает сложно поставить верный диагноз. Только сбор анамнеза и дополнительные методы диагностики позволят определить заболевание более точно.
Среди наиболее распространенных причин лимфопении следует выделить:
- СПИД;
- различные поражения печени в хронической форме;
- заболевание крови, при котором угнетаются все ростки костного мозга – апластическая анемия;
- патологии гнойного и септического характера;
- инфекционные болезни в тяжелой форме;
- острый милиарный туберкулез (часто путают с брюшным тифом);
- лечение посредством химио- и лучевой терапии;
- разрушение лимфоцитов (может наступать при некоторых болезнях, к примеру, красной волчанке, или же в результате приема определенных групп препаратов – кортикостероидов, цитостатиков и др.);
- нарушения в работе иммунной системы врожденного характера;
- почечная недостаточность;
- лимфогранулематоз;
- синдром Иценко-Кушинга;
- спленомегалия;
- рак в лимфатической системе;
- инфекционные и гнойно-воспалительные болезни в острой форме (абсцесс, ангина, грипп, воспаление легких и др.).
Болезни и состояния, провоцирующие лимфопению, часто классифицируются как тяжелые и опасные для организма, имеют неблагоприятный прогноз. Поэтому, если анализ крови продолжительное время показывает низкие лимфоциты, – это сигнал к тому, что следует провести тщательное медицинское обследование.
Низкий уровень лимфоцитов в крови ребенка
У ребенка лимфопения не имеет никаких заметных клинических симптомов. Но на фоне клеточного иммунодефицита родители могут наблюдать следующие признаки:
- экзема, гнойные поражения кожных покровов;
- очаговое облысение – алопеция;
- бледность или желтушность кожи;
- геморрагические пятна на коже.
Клиническая диагностика также выявит значительное уменьшение лимфатических узлов и миндалин и спленомегалию (увеличение селезенки).
Когда в крови ребенка низкий уровень лимфоцитов, то учащаются рецидивы инфекционных болезней. Часто их возбудителями становятся редкие штаммы микроорганизмов.
Возможные симптомы
Как и у детей, у взрослых практически отсутствует явно выраженная симптоматика лимфопении. Среди встречающихся проявлений можно выделить следующие:
- повышение температуры тела;
- общая слабость;
- быстрая утомляемость;
- выпадение волос.
Также для взрослых характерны и описанные выше симптомы: уменьшение лимфатических узлов, бледность кожи и её гнойное поражение, экзема, увеличение селезенки. Если вы заметили у себя один или несколько из указанных признаков, следует обратиться к врачу для прохождения полной диагностики и определения методов терапии.
Лечение лимфопении
Лимфопения сама по себе не может быть скорректирована. Для восстановления нормального уровня лимфоцитов потребуется лечение первичной болезни. Когда поставлен диагноз хронической лимфоцитопении, то потребуется вводить иммуноглобулин в организм инъекционным способом. Низкий уровень лимфоцитов по причине врожденного иммунодефицита может быть исправлен путем трансплантации стволовых клеток.
Если стандартная диагностика не позволила определить заболевание, ставшее причиной лимфопении, то гематолог может направить пациента на дополнительные исследования: МРТ/КТ, УЗИ, цитологические и гистологические анализы, рентген и т.д.
Повышенные лимфоциты
Повышенные лимфоциты могут быть следствием острых аллергических реакций
Повышение лимфоцитов – тревожный симптом, ведь он может свидетельствовать о развитии в организме следующих заболеваний:
- бактериальные инфекции;
- острые аллергические реакции;
- заболевания аутоиммунного характера;
- анафилактический шок;
- развитие доброкачественных или злокачественных новообразований.
Лимфоцитоз может иметь две формы:
- Относительный лимфоцитоз. В данном случае не происходит изменений абсолютного числа клеток, увеличивается лишь удельный вес лимфоцитов, которые вытесняют из лейкоцитарной формулы другие кровяные тельца.
- Абсолютный лимфоцитоз. Характеризуется резким увеличением количества данных клеток. Подобное чаще всего наблюдается в качестве ответа организма на развитие какой-либо патологии.
Толчком для повышения количества лимфоцитов при относительном лимфоцитозе могут выступать:
- ревматические заболевания;
- вирусные инфекции, протекающие в острой форме;
- спленомегалия;
- повышение функции щитовидки.
Абсолютный лимфоцитоз могут спровоцировать следующие заболевания:
- лучевая болезнь;
- бронхиальная астма;
- хронический лимфолейкоз;
- туберкулез;
- коклюш.
Одной из причин развития данной формы лимфоцитоза может стать недавно перенесенная операция, в ходе которой пациенту удалили селезенку.
Симптомы
Один из симптомов лимфоцитоза скачки температуры тела
Проявления лимфоцитоза редко бывают яркими. В большинстве случаев отклонение от нормы выявляется совершенно случайно, в ходе планового осмотра или обследования в связи с другими жалобами. Тем не менее, на развитие данного состояния могут указывать следующие факторы:
- резкая и беспричинная потеря веса;
- увеличение лимфоузлов в размерах;
- сниженный иммунитет, о чем свидетельствует частое возникновение простудных заболеваний;
- снижение работоспособности, быстрая утомляемость;
- расстройства сна;
- проблемы с пищеварением;
- средняя температура тела – 37 градусов, которая скачкообразно изменяется без всякой причины;
- возникновение аллергии при контакте с веществами, ранее не вызывавшими подобных реакций и т. д.
Таким образом, симптоматика лимфоцитоза является весьма размытой.
Лечение
Следует помнить о том, что лимфоцитоз не является самостоятельным заболеванием, потому симптоматическое лечение в данном случае не принесет ощутимых результатов. Терапия должна быть направлена на устранение первопричины патологии. Чаще всего речь идет о применении следующих методик:
- Если причиной повышения лимфоцитов является гипотиреоз, то лечением данного заболевания будет заниматься эндокринолог. Назначается терапия тиреоидными гормонами с индивидуальным подбором дозировки.
- Лечение хлороза предполагает использование аскорбиновой кислоты и препаратов железа.
- Мононуклеоз. В данном случае проводится симптоматическая терапия. Ввиду того, что данное заболевание провоцирует воспаление миндалин, специалист может назначить антибиотики пенициллинового ряда.
- При наличии в организме гнойных процессов используются антибактериальные средства. Та же методика применяется и при лечении сепсиса. Для повышения эффективности такого лечения введение антибиотиков осуществляется внутримышечно или внутривенно.
- Если причиной развития лимфоцитоза является лейкоз или миелома, то пациент направляется на химиотерапию. В ряде случаев после курса такого лечения больному требуется трансплантация костного мозга. При своевременности и правильности таких действий удается добиться стойкой ремиссии.
Источник