Как делается гистология лимфоузла
Навигация по статье:
Что такое Гистологическое исследование биоптата лимфоузла?
Увеличение лимфатических узлов (лимфоаденопатия) является ведущим синдромом целого ряда заболеваний.
Лимфатические узлы выполняют, как известно, барьерно-фильтрационную и иммунную функции. Лимфа, протекающая по синусам лимфатических узлов, профильтровывается через петли ретикулярной ткани: здесь задерживаются мелкие инородные частицы, попавшие в лимфатическую систему из тканей (микробные тела, опухолевые клетки и т. п.), а в лимфу поступают лимфоциты, образующиеся в лимфоидной ткани лимфатических узлов.
Различают два основных типа патологических изменений лимфатических узлов:
Распространенное, системное поражение лимфоузлов, обусловленное как воспалительными их изменениями (например при некоторых инфекциях), так и опухолевым разрастанием при заболеваниях крови (см. ниже).
Местное увеличение регионарных лимфатических узлов как воспалительного (локальные гнойные процессы), так и пеопластнческого характера (метастазы рака).
Лимфоузлы угла нижней челюсти, подъязычные и подчелюстные лимфоузлы поражаются при местных патологических процессах (воспаление, рак) в миндалинах, полости рта; околоушные и заушные – при заболеваниях наружного и среднего уха; затылочные – при патологических процессах в области волосистой части головы и на шее; шейные лимфатические узлы – при поражении гортани и щитовидной железы (рак, тиреоидиты); надключичные лимфоузлы слева – при метастазах рака желудка (Вирховская железа) и т. д.
Локтевые лимфоузлы собирают лимфу из V, IV и III пальцев руки, подмышечные – из I, II и III пальцев, а также из области грудной железы (рак, мастит и др.).
Особое диагностическое значение имеет метастазировапие рака легкого в подмышечные лимфоузлы. При воспалительных и неопластических поражениях указанной локализации могут вовлекаться в патологический процесс также подключичные и даже надключичные лимфатические узлы.
Воспалительное или опухолевое поражение молочных желез нередко сопровождается увеличением подмышечных, подключичных, надключичных и парастернальных лимфоузлов.
Паховые лимфатические узлы собирают лимфу из половых органов и органов малого таза, а также из тканей нижних конечностей, подколенные – из области задней поверхности голеней.
Техника исследования
Для морфологического исследования лимфатических узлов используют два способа получения материала:
пункцию узла с цитологическим анализом мазков, приготовленных из пунктата.
биопсию лимфатического узла с последующим цитологическим исследованием отпечатков и гистологическим исследованием срезов. Более информативным является изучениебиоптатов, поскольку в этом случае можно оценить не только морфологию отдельных клеточных элементов, по и гистологическую структуру лимфатического узла, что важно в диагностике целого ряда заболеваний. В то же время следует помнить, что процедура пункции лимфоузла чрезвычайно проста и при необходимости может осуществляться повторно.
Биопсию лимфатического узла проводят с соблюдением всех правил оперативной техники. Удаленный узел разрезают, на его поверхности готовят отпечатки, которые затем подвергают цитологическому исследованию. Сам лимфоузел направляют в патологоанатомическую лабораторию, где из пего приготавливают срезы для гистологического исследования. Пункцию лимфатического узла проводят обычно без местной анестезии простой инъекционной иглой, надетой на 10-граммовый шприц. Из полученного материала приготавливают мазки.
Исследование пунктата лимфатического узла включает:
выявление патологических элементов;
подсчет клеточных элементов в мазках пунктата и выведение их процентного соотношения (исследование лимфаденограммы).
Выявление патологических элементов
Под малым увеличением микроскопа просматривают все препараты для выявления различных патологических элементов, не свойственных ткани лимфатического узла в норме. При их обнаружении проводят более детальное исследование с иммерсионными объектами.
Почему важно делать гистологического исследования биоптата лимфоузла?
Наиболее важное диагностическое значение имеет обнаружение следующих патологических элементов:
Клетки Березовского-Штернберга, характерные для лимфогранулематоза. Они представляют собой крупные многоядерные клетки размером до 50-80 мкм, которые отличаются значительным полиморфизмом, интенсивно окрашены. В ядре содержатся большие нуклеолы неправильной формы с неровными краями.
Клетки злокачественных лимфом, замещающие нормальные элементы лимфатического узла. Их морфология определяет клинический вариант лимфомы, поэтому в пунктатах лимфатического узла у разных больных можно встретить патологические клетки, напоминающие лимфобласты, пролимфоциты, зрелые лимфоциты (лимфобластная п пролимфобластная лимфосаркома, лимфоцитариая лимфома) или клетки с выраженной апаплазией.
Лейкемическая инфильтрация, характерная для того или иного вида лейкоза. Например, при остром лейкозе в пунктатах лимфатических узлов можно обнаружить тотальную бластную инфильтрацию, при хроническом, миелолейкозе и других миелопролиферативных заболеваниях клетки миелоидного ростка кроветворения различной зрелости (промиелоциты, миелоциты, небольшое количество бластиых клеток) и т. п. При лимфопролиферативных заболеваниях (например при лимфолейкозе) обнаруживают пролиферацию лимфоидных клеток, хотя иногда такую пролиферацию достаточно трудно отличить от обычной лимфоидной ткани. В этих случаях лучше ориентироваться на данные стернальной пункции и трепанобиопсии.
Атипичные клетки при метастазах рака в лимфатические узлы. Морфологические особенности таких атипичных клеток (метастазы плоскоклеточного, железистого и других форм рака), выявляемые при микроскопии, позволяют предположить локализацию первичного очага опухоли (щитовидная железа, почки, яички, желудок, легкие, молочная железа и др.).
Элементы туберкулезной гранулемы, к которым относятся:
гигантские многоядерные клетки Пирогова-Лангханса размером 30-50 мкм вытянутой формы;
овальные (бобововидпые) эпителиоидные клетки;
скудное количество клеток на фоне бесструктурного детрита.
Последний признак наиболее важен, так как он отражает характерную особенность туберкулезного поражения лимфатических узлов – казеозное (творожистое) расплавление, хотя этот признак встречается не всегда при этом заболевании. Важно, что при саркоидозе детрит (так же как казеозное расплавление лимфатического узла) отсутствует, но могут встречаться клетки Пирогова-Лапгханса и эпителиоидные клетки.
При каких заболеваниях делается Гистологическое исследование биоптата лимфоузла?
Морфологическое исследование лимфоузлов используют для уточнения диагноза следующих заболеваний:
гемобластозов, особенно лимфом;
метастазов рака в регионарные лимфоузлы;
туберкулеза и саркоидоза;
неспецифических воспалительных лимфаденитов и т. д.
Материал для сдачи гистологического исследования биоптата лимфоузла
Биоптат лимфатического узла.
Пунктат лимфатического узла.
Срок выполнения гистологического исследования биоптата лимфоузла
30 рабочих дней.
Повышения нормы наблюдаются при следующих заболеваниях гистологического исследования биоптата лимфоузла
При реактивных лимфаденитах наблюдается увеличение ретикулярных клеток, появление иммунобластов и макрофагов. Острые лимфадениты характеризуются увеличением (редко преобладанием) иейтрофплов и макрофагов.
К каким докторам следует обращаться для консультаций по гистологическому исследованию биоптата лимфоузла?
Источник
Гистологическое исследование биопсийного материала лимфоузлов — это исследование под микроскопом материала лимфоузлов больного, полученного во время биопсии. Гистологическое исследование является самым важным в диагностике злокачественных опухолей, одним из методов оценки лекарственного лечения.
Гистологическое исследование лимфатических узлов представляет собой мелкое хирургическое вмешательство, при котором от них отделяется небольшой кусочек для проведения исследования. Биопсия лимфоузла даёт возможность изучить его строение и выявить патологические отклонения, а также признаки воспалительных процессов.
Лимфатические узлы являются основной частью защитного механизма человека, которые соединяются с лимфатическими сосудами. Лимфатические узлы являются частью иммунной системы организма и помогают бороться с инфекцией, вырабатывая специальные белые клетки крови — лейкоциты. Лимфатические узлы улавливают бактерии, вирусы и даже раковые клетки. Увеличение лимфатического узла может быть связано как с его воспалением, так и свидетельствовать о протекании патологических процессов в соседних органах и во всём организме. Увеличение их в размере говорит о нарушении функциональности организма. Нормальное состояние лимфоузлов характеризуется безболезненностью, причём их нельзя прощупать.
Биопсия лимфатических узлов позволяет определить наличие раковых клеток, доброкачественные новообразования, различные абсцессы и специфичность инфекционного воспаления. Она может проводиться в области паха, подмышек, шеи, нижней челюсти, а также для узлов за ушами.
Биопсия лимфоузлов бывает двух типов — пункционная и открытая. Пункционная биопсия проводится при введении местных обезболивающих препаратов. Открытая биопсия проводится с использованием общей анестезии. Производится удаление лимфатических узлов через разрез.
Показания:
- гемобластозы, особенно лимфомы;
- метастазы рака в регионарные лимфоузлы;
- туберкулёз и саркоидоз;
- неспецифические воспалительные лимфадениты и т. д.
Биопсия лимфоузлов назначается пациентам, у которых необходимо определить характер имеющейся опухоли, особенно когда подозревается онкология. В некоторых случаях процедура используется для диагностирования инфекционных заболеваний.
Подготовка
Перед отбором материала для проведения биопсии необходимо прекратить применение медикаментозных средств, способных повлиять на показатели свёртываемости крови, так как повышается вероятность кровотечения.
Интерпретация результатов
После просмотра мазков пунктата и выявления патологических элементов приступают к подсчёту клеток и выведению лимфаденограммы. Для этого под иммерсионным объективом просматривают и дифференцируют не менее 500 клеток, рассчитывая их процентное содержание. Лимфаденограмма имеет значение в диагностике неспецифических лимфаденитов.
Нормальная лимфаденограмма (по Люкасу)
Тип клеток/Количество(%):
- Лимфобласты 0,1–0,9.
- Пролимфоциты 5,3–16,4.
- Лимфоциты 67,8–90,0.
- Ретикулярные клетки 0–2,6.
- Плазмоциты 0–5,3.
- Моноциты 0,2–5,8.
- Тучные клетки 0–0,5.
- Нейтрофильные гранулоциты 0–0,5.
- Эозинофильные гранулоциты 0–0,3.
- Базофильные гранулоциты 0–0,2.
В пунктате лимфатического узла преобладают зрелые лимфоциты и пролимфоциты, которые суммарно составляют около 95–98% клеток.
При реактивных лимфаденитах наблюдается увеличение ретикулярных клеток, появление иммунобластов и макрофагов. Острые лимфадениты характеризуются увеличением (редко преобладанием) нейтрофилов и макрофагов.
Источник
Исследование лимфатического узла. Правила взятия и обработки лимфатического узла.
Наибольшим препятствием при постановке правильного морфологического диагноза являются недостаточно совершенные методы взятия и обработки биоптатов лимфатических узлов. При проведении биопсийного исследования всегда нужно помнить о том, что его задача состоит в своевременном и точном диагнозе, на котором основывается тактика ведения больного.
Важную роль в достижении соответствия и поддержания высоких стандартов биопсий лимфатических узлов играет «обратная связь» между морфологами и клиницистами, в том числе совместные конференции. Кроме того, необходим индивидуальный контакт, обеспечивающий возможность корректировать недостатки методик взятия биопсийного материала и его проводки.
Для биопсийного исследования, по возможности, следует отбирать наиболее патологически измененные лимфатические узлы. При этом желательно забирать узел целиком с интактной капсулой. Сегментированные же лимфатические узлы в зависимости от характера патологического процесса могут быть более затруднительны для диагностики. При значительном фиброзировании ткани биоптата или взятии его из ограниченного пространства (такого как переднее средостение) обычно наиболее выражены артефакты растяжения.
Сегодня для диагностики патологии лимфатических узлов чаще всею используются пункционные биопсии. По возможности для поверхностных, легко доступных лимфатических узлов следует использовать «открытые» биопсии; однако, в отличие от них, для пункционных биопсий характерна более низкая болезненность. Кроме того, пункционные биопсии оказываются особо ценными при исследовании абдоминальных и забрюшинных лимфатических узлов, так как не требуют выполнения лапаротомии.
В этих случаях биопсийный материал обычно забирается под контролем УЗИ или КТ. Быстрая фиксация пункционного биоптата обеспечивает хорошее сохранение морфологической структуры, что наряду с иммуногистохимическим исследованием позволяет достаточно точно идентифицировать наиболее частые лимфомы. Однако этот метод может оказаться менее успешным в идентификации пеопухолевых пролиферативных состояний.
Тонкоигольные аспирационные биопсии имеют наибольшую ценность при дифференциальной диагностике карцином и лимфом и при идентификации рецидивов заболевания или определении его стадии.
При первичном диагнозе лимфомы значение этого метода ограничено, а при отсутствии достаточного опыта работы цитопатолога не исключены многие ошибки.
Материально-техническое обеспечение многих лабораторий предопределяет поступление биоптатов лимфатических узлов в фиксированном состоянии. При этом объем фиксатора должен превышать объем биоптата минимум в 10 раз. Целые лимфатические узлы следует рассекать для обеспечения быстрого проникновения фиксатора.
В идеале, лаборатории должны получать биоптаты лимфатических узлов «свежими», сразу после эк-сцизии. С целью быстрой оценки цитоплазмы можно к тонкому срезу, взятому из одного конца узла, осторожно приложить чистое предметное стекло, высушить на воздухе и окрасить одним из быстрых методов — по Романовскому. При необходимости патологи, имеющие опыт работы с данной методикой, могут предоставить клиницистам предварительный цитологический диагноз. Однако эта методика наиболее полезна для определения способа последующей проводки биоптата в лаборатории.
Для последующего молекулярного исследования срез лимфатического узла, используемый для приготовления отпечатков, может быть заморожен. По возможности следует избегать его использования для гистологического исследования, поскольку процесс приготовления отпечатков часто вызывает в ткани артефакты растяжения.
По показаниям свежая ткань может быть использована для цитогенетического и/или проточного цитометрического анализа. При необходимости из замороженных срезов могут быть приготовлены препараты для морфологического и иммуногистохимического исследования. Для гистологического и иммуногистохимического исследования один или более срезов узла следует поместить в фиксирующий раствор на ночь (или дольше). При пункпионных биопсиях период фиксации сходный. К счастью, с диагностической целью для фиксированной ткани может быть использован широкий диапазон методов исследования, таких как иммуногистохимия. полимеразная цепная реакция (ПЦР) для определения клопальности, транслокаций и т. д.. флуоресцентная гибридизация in situ (FISH).
– Также рекомендуем “Пункционные биопсии. Биопсии целых лимфатических узлов.”
Оглавление темы “Лимфатический узел. Исследование лимфатического узла.”:
1. Исследование лимфатического узла. Правила взятия и обработки лимфатического узла.
2. Пункционные биопсии. Биопсии целых лимфатических узлов.
3. Проводка и изготовление срезов лимфатических узлов. Окрашивание срезов лимфатических узлов.
4. Дифференцировка лимфом. В-клеточная лимфома.
5. Маркеры В-клеточных лимфом. Диагностика Т-клеточных лимфом.
6. Маркеры Т-клеточных лимфом. Признаки Т-клеточных лимфом.
7. NK-клеточные лимфомы. Лимфома Ходжкина.
8. Маркеры пролиферации клеток. Смешенные маркеры клеток.
9. Исследование биопсий. С чего начать исследование биопсий.
10. Оценка строения синуса. Оценка капсулы лимфатического узла.
Источник
Цитология (гистология) биопсии лимфоузлов при воспаленииМононуклеозным лимфаденитом могут страдать как взрослые, так и дети. При необходимости выполнения гистологического исследования (когда серологические методы диагностики оказываются неинформативными) проводится эксцизионная биопсия лимфоузла, при которой определяется частично сглаженная лимфоидная архитектура, расширение паракортикального Т-клеточного слоя, редкие включения иммунобластов. При лимфадените, вызванном ВИЧ-инфекцией, в зависимости от стадии заболевания возможно наличие одного из трех типов гистологических изменений. При типе А лимфоузлы незначительно увеличены, их лимфоидная архитектура умеренно нарушена, определяются включения моноцитов. При типе В обнаруживают сглаженные фолликулы, снижение числа лимфоцитов и гиперплазию кровеносных сосудов. При типе С определяются очаги гиалинизации, интенсивный ангиогенез с формированием многочисленных артериол, покрытых гиалиновой оболочкой. Болезнь от кошачьих царапин обычно проявляется односторонним лимфаденитом, лимфатические узлы плотно спаяны друг с другом, при их микроскопии находят некротизирующие гранулемы с центральными микроабсцессами. Для лимфаденита при токсоплазмозе характерно увеличение заднешейных лимфоузлов с сохраненной лимфоидной архитектурой, перифолликулярными и интрафолликулярными скоплениями эпителиальных клеток, включениями моноцитов, гранулемы или некроз отсутствуют. При туберкулезном лимфадените обнаруживают участки казеозного некроза с формированием гранулем, при использовании специальных методов окраски обнаруживают редкие палочкообразные микроорганизмы (кистолоустойчивые бактерии). Также лимфаденопатия может возникать при мультисистемном саркоидозе. При болезни Кимура, которой чаще страдают молодые азиаты мужского пола), отмечается увеличение лимфоузлов шеи и околоушной области. Болезнь Кикучи, которой также чаще болеют молодые жители Азии, сопровождается увеличением шейных лимфоузлов с одной стороны, в большинстве случаев заболевание разрешается самостоятельно. Синусный гистиоцитоз с массивной лимфаденопатией (болезнь Розаи-Дорфмана), которым чаще всего страдают дети и подростки, характеризуется массивной длительной генерализованной лимфаденопатией. При воспалительной псевдоопухоли определяется увеличение в размере лимфоузлов и мягких тканей, в результате чего те начинают напоминать новообразования. При микроскопии определяют пучки и скопления веретенообразных клеток (фибробластов и миофибробластов), пролиферацию кровеносных сосудов, признаки хронического воспаления, отсутствие признаков моноклональности.
– Также рекомендуем “Цитология (гистология) биопсии лимфоузлов при опухоли” Оглавление темы “Отоларингология”:
|
Источник