Иммунизация лимфоцитами при беременности

Вопрос: «Добрый день! По данным из иностранных источников, анализ на HLA-типирование супругов и дальнейшее лечение (ЛИТ-терапия, иммуноглобулин) не имеет достаточной базы исследования, и результативность данного лечения не доказана. И, по сути, в России назначение терапии супругам при совпадении по четырем и более пунктам – не более чем эксперимент клиники».

Ответы на ваши вопросы в передаче “В ЦИРе и в мире”. Отвечает Игорь Иванович Гузов, акушер-гинеколог, к.м.н., основатель Центра иммунологии и репродукции.

Я хотел бы сказать, если речь идет о ЛИТ, что это специфический отечественный метод исследования, который показал себя достаточно хорошо. И он никак не может рассматриваться экспериментом, потому что в этом году мы будем отмечать 50-летие самой методики лечения. То есть предшественником ЛИТ была пересадка кожного лоскута, и она давала возможность получить беременность и её развитие в очень тяжелых случаях. У первого пациента, на котором была применена пересадка кожного лоскута, было 15 выкидышей.
Лимфоцитоиммунотерапия достаточно широко сейчас используется за рубежом, но не во всех странах.

Есть страны, которые прекратили использовать ЛИТ потому, что их досаждали регулирующие органы. Например, в США не запретили, но сказали, что будут использовать по специальному разрешению, и никому разрешения не дали. И пациентки эти вынуждены мотаться по всему миру, иногда к нам приезжают, для того чтобы мы сделали ЛИТ. Последняя большая публикация была в апреле 2018 года в Бразилии, и результаты, которые они показали, примерно те же, что получаем мы.
Наиболее явственно получать статистику вы начинаете тогда, когда концентрируется группа, где количество случаев остановок развития беременности у пациентки было больше 5.

То, что касается назначения иммуноглобулинов, это отдельный вопрос. Почему те специалисты, которые проводили эти статистические исследования, не смогли получить эту статистику? Это связано с тем, что игнорировались основные принципы системной биологии и основные принципы так называемой трансляционной медицины. Когда мы имеем гетерогенную группу, а её начинают считать гомогенной, думая, что они провели рандомизацию. И не назначают ничего, либо аспирин, либо иммуноглобулин, либо делают ЛИТ. То есть не учитывается сложность ситуации, которая идёт внутри группы. Поэтому, если брать доказательность, то те рекомендации, которые бы вышли в конце 2017 года в Европе, они тогда получается ничего не доказали. Тогда ни иммуноглобулины, ни ЛИТ, ни антитела к щитовидной железе, ни уровень гормонов самой щитовидной железы, ни целый ряд других показателей, которые связаны с рисками невынашивания беременности, не учитываются. И это, конечно, абсолютно абсурдная ситуация, когда мы видим, что наши восточные соседи идут совершенно по другому пути. Япония, Южная Корея, Китай, Тайвань считают, что доказательная база для применения иммунологических методов лечения вполне хорошая, и у них как раз все те методы лечения, которые Вы перечислили, включены в национальные рекомендации, которые там используются.

Поэтому не знаю, мы сейчас это всё обсуждаем. Конечно, вот эти рекомендации, которые вышли в ESHRE (Европейское Общество по вопросам репродукции человека) в конце 2017 года – это нонсенс. Я не поехал в Инсбрук, потому что в Инсбруке в конце 2018 года должна была быть очередная европейская встреча. Они должны были там думать и обсуждать как дальше работать в
такой ситуации, когда практически пациенты лишились и обследования, и лечения при невынашивании беременности. То есть вам просто говорят: «Знаете, у вас идиопатической форма, мы не знаем никаких причин, мы не имеем права назначить никакого лечения…»

Само по себе невынашивание беременности таково, что в части случаев бывает так, что никаким способом лечения продолжить развитие беременности невозможно, потому что идут сбои (хромосомные) со стороны самого плодного яйца. Но если брать, допустим, назначение иммуноглобулинов – когда мы смотрели вот те исследования, которые были – какие исследования не доказали пользу иммуноглобулинов? Исследования, когда иммуноглобулины начинали назначаться после 8 или после 12 недель беременности! Ну, ребята, уже всё – к этому времени беременность или нормально развивается, или она уже дает какие-то сбои, и вы будете получать нарушения.

Поэтому вопрос здесь заключается в том, что, безусловно, иммунологические факторы играют колоссальную роль в невынашивании беременности, и с этим никто не спорит. Назначение иммуноглобулинов в правильном режиме абсолютно безопасно, и дает определенное повышение шансов вынашивания беременности. Назначать их нужно в нужной дозе и по нужной схеме.

Назначение ЛИТ порой является единственным фактором, который может повысить вероятность вынашивания беременности у части супружеских пар. Достижение иммунологии и репродукции в частности изучение роли так называемых Т-регуляторных клеток и изучение роли факторов мужа при закладке риска невынашивания беременности, в настоящее время позволяют нам уже говорить о тех механизмах действия лимфоцитиммунотерапии, которые совсем до недавнего времени были не известны. Поэтому я очень рад тому, что сейчас мы имеем эти методики, что мы очень большому проценту наших пациенток можем помогать.

Бесплодие — это не болезнь, это симптом, говорящий о наличии факторов, которые снижают фертильность у мужа и жены. Как правило, существует не один фактор, а наборы факторов. Тщательное обследование и улучшение каждого из факторов во многих случаях помогают решить проблему.
Вы можете записаться на консультацию в ЦИР онлайн.

Источник

Вопрос: «Добрый день! Насколько эффективна лимфоцитотерапия при совпадении HLA супругов? Возможны побочные реакции? Какими анализами нужно контролировать эффективность ЛИТ?»

Я бы сказал так: конечно, здесь вопрос насчет эффективности не полностью изучен, это комплексное, достаточно сложное лечение. Но можно сказать, что если есть совпадение по HLA генам между мужем и женой, то в сочетании с проблемами репродуктивной функции: бесплодием, невынашиванием беременности, неудачными попыткками ЭКО – ЛИТ во многих случаях решает проблему этого фактора невынашивания беременности.

То есть всегда бывает очень трудно установить причинно-следственную связь: эта похожесть является значимым фактором в невынашивании беременности, или просто сопутствующий фактор? Этого мы на сегодняшний момент полностью сказать никогда не можем, поэтому во многих случаях лимфоцитиммунотерапия является перестраховкой.

Какие возможны побочные реакции? Это местные реакции, то есть небольшая припухлость в месте подкожных инъекций лимфоцитами, и иногда 1-2 дня какая-то небольшая субфебрильная температура. Всё. Если правильно всё делать, никаких других побочных реакций нет. Я говорю про ту практику ЛИТ, которую мы используем у себя.

Если готовится препарат крови – должно быть правильное и систематическое обследование обоих супругов на скрытое носительство вирусных инфекций. И если это не проводится – это опасно! Если вдруг муж является носителем инфекции, то можно заразить жену. И карантин, как мы считаем, это важная вещь, чтобы исключить то, что муж находился в инкубационном периоде. То есть первое, что нужно исключать – это инфекции. И у нас в течение уже больше 20 лет (как мы с этим работаем) не было ни одного осложнения!

Второй фактор, который может подстерегать супругов, это степень отметки отмывки самого препарата.Ну во-первых; он должен быть отмыт от эритроцитов, для того чтобы не было конфликта по резус-фактору или по группам крови, который потенциально может быть. Это мы исключаем. И это уже сама технология того, как работать с кровью: то есть мы, когда делаем эту отмывку, абсолютно гарантируем, что внутри препарата могут быть только единичные эритроциты, доза которых будет абсолютно недостаточной для того, чтобы вызвать какой-либо конфликт. То есть мы абсолютно уверены, что внутри препарата, который мы делаем, опасных по иммунизации эритроцитов не будет.

Еще одним важным моментом, который касается возможных побочных эффектов лимфоцитоиммунотерапии, и об этом нужно помнить, это отмывка препарата от тромбоцитов. То есть на первом этапе отмывки убираются все эритроциты, остается так называемая лимфо-тромбоцитарная масса, и на втором этапе отмывки очень важно, чтобы уже на других центрифужных скоростях происходила отмывка препарата от тромбоцитов. Потому что тромбоциты имеют свою группу крови, и если здесь пропустить этот этап, то тогда возможны достаточно большие сложности со здоровьем. Когда делаем мы, то полностью это всё исключаем, потому что обращаем на это особое внимание.

И последний фактор, который может быть – это реакция «трансплантат против хозяина», когда живые клетки, которые подсаживаются, могут атаковать иммунную систему матери. У нас не было ни разу подобной реакции, потому что мы, когда делаем препарат, непосредственно уже перед вот этой прививкой, заглушаем активность клеток, которые подсаживаются. Это дает нам гарантию того, что мы не получим реакцию «трансплантат против хозяина». Прививка делается всего лишь один раз, потому доза лимфоцитов (200- 250 миллионов клеток), обеспечивающая разовую такую иммунизацию, действует очень долго.

Вот если соблюдать все эти этапы, технологию, как делаем это мы, то возможных побочных реакций, которые я вам описал, не будет.

Саму методику мы обсуждали с её автором, профессором В.И.Говалло, еще при создании нашего центра в 1996 году, и я могу сказать, что это очень хороший метод лечения, который заменил собой подсадку кожного лоскута. Это в какой-то степени наш национальный метод лечения, потому что в том виде, в каком мы его применяем, он был разработан внутри нашей страны. На Западе применялись различные варианты, но не в этом виде, так как важны все нюансы этого процесса. И, безусловно, это очень хороший метод! К нам приезжает достаточно большой поток пациентов из совершенно разных стран. Недостатком же является постоянное подорожание самой процедуры. То есть сама технология приготовления этих клеток: использование необходимых расходных материалов, необходимость хранения между периодом сдачи и самой прививкой, использование сложных сред – всё это достаточно сложная процедура, поэтому, к сожалению, цена на этот метод растет, и в ближайшее время чуть-чуть ещё подрастет. Но с другой стороны, это однократная процедура,если делать по нашей методике.

Читайте также: Лимфоциты не способны к

«Какими анализами нужно контролировать эффективность ЛИТ?» Практически проконтролировать эффективность ЛИТ можно только доношенной беременностью. Когда мы только-только начинали заниматься этой методикой, мы пытались смотреть по смешной культуре лимфоцитов: возникла реакция на клетки мужа или не возникла? Но потом мы поняли: для того чтобы смешанная культура лимфоцитов совершила вираж реакции, требуются совершенно другие дозы, а мы просто не можем с ними экспериментировать. Когда мы делаем вот эту однократную прививку и вводим 200-250 миллионов клеток, физиологическая память организма матери о встрече с этими клетками сохраняется и существуют в течение всей жизни, но реально проверить это можно только если было невынашивание, а потом наступила беременность, и всё прошло благополучно. Другими способами это трудно проверить, и поэтому мы, уже наверное лет 15 как, отказались от проведения СКЛ (смешной культуры лимфоцитов) после самой прививки. Какое-то время мы это делали, а потом поняли, что это не нужно. То есть мы не получаем той информации, которую мы хотели получить по СКЛ.

Вы можете записаться на консультацию в ЦИР онлайн.

Источник

Вторая часть эфира 2 июля.
HLA-гены и иммунология репродукции. Кожный лоскут. Иммунизация лимфоцитами (ЛИТ). СКЛ – смешанная культура лимфоцитов. Иммунологический фактор при невынашивании беременности.

Начало: Зачем нужны мужчины? Роль полового размножения. Теория Красной королевы. Введение в иммунологию репродукции.

HLA-гены и иммунология репродукции
Так какая же система самая разнообразная внутри организма и что обеспечивает защиту от инфекций? Это система генов иммунитета – HLA-гены. Все эти гены располагаются на 6-й хромосоме и определяют индивидуальность иммунного ответа, чувствительность к тем или иным стимулам.
Вот здесь как раз речь заходит об иммунологии репродукции, о том, чем занимается наш Центр. Если смотреть наш сайт, то можно увидеть, что существует так называемый аллоиммунный фактор бесплодия и невынашивания беременности. Он связан с антигеном тканевой совместимости, с похожестью или непохожестью по антигенам тканевой совместимости. Риски в репро-дуктивном процессе профессора-имунолога Валентина Ивановича Гавалло, который является родоначальником иммунологии репродукции в нашей стране.
Иммунология репродукции не сразу развивалась, как отдельное направление. Иммунологов всегда интересовало множество других вещей, а иммунология репродукции была интересна в последнюю очередь. Но всё же, в процессе развития в этой области медицины, иммунология репродукции сформировалась в отдельное направление. В какой-то момент было найдено, что есть определённые вещества, которые назвали антигенами тканевой совместимости или главным комплексом гистосовместимости, или системой антиген-лейкоцитов человека. Если эти компоненты совпадают у людей, то можно пересаживать органы и они будут приживаться в новом теле.

Кожный лоскут
Оказывается, что если во время беременности идёт непохожесть между плодом и матерью по антигенам тканевой совместимости, то в организме матери возникает ответ на эти антигены. Тогда в крови матери (и вообще, в крови рожавших женщин) можно обнаружить огромное количество антител против антигенов тканевой совместимости, которые плод наследовал от отца. И находясь внутриутробно, плод вызывал на себя иммунный ответ организма матери.
Исследователями было высказано предположение, что действие этих антител на плод очень вредно, так как в некоторых случаях они повреждали и убивали его. Такие случаи называют «привычное невынашивание беременности».
Для лечения этих случаев и сопутствующих осложнений нашли такой способ: у мужа брали лоскут кожи и подсаживали женщине, чтобы этот лоскут был иммуносорбентом вредных антител, образовавшихся во время предыдущих беременностей. Тогда у плода появлялась возможность спокойно развиваться. Такое лечение невынашивания беременности начали проводить в Америке, в Чехословакии, и далее, в Европе, и оно действительно работало.
В какой-то момент и в России, в Москве решили заниматься таким лечением. В Институте акушерства и гинекологии была создана лаборатория клинической иммунологии, заведующей которой стала Лидия Сергеевна Волкова. Она обратилась с предложением сотрудничества к молодому тогда ещё Валентину Ивановичу Говалло, который простажировался в Чехословакии у Гашека, известного иммунолога-трансплантолога; и посетил лабораторию Дассе в Париже. Гавалло начал разработку систем тканевого типирования ещё в Институте травматологии и ортопедии, и проводил эксперименты по пересадке кожных лоскутов на мышах.
Одной из первых пациенток стала женщина, у которой ранее было 15 выкидышей. Сама беременность наступала у неё легко, но потом она не могла её выносить. И было проведено ей вышеописанное лечение с подсадкой кожного лоскута мужа, которое тоже прошло успешно. А после этой беременности у пациентки были ещё две последующие удачные беременности. И в то время данный случай просто потряс врачей, проводивших это лечение. С тех пор эта методика начала широко применяться в России и в сопредельных государствах.

Иммунизация лимфоцитами
А иммунология репродукции продолжала развиваться. Скоро поняли, что упомянутые кожные лоскуты – не сорбенты, а иммуностимуляторы, вызывающие на себя реакцию отторжения. А эта методика – как раз та самая иммунизация, в процессе которой формируются антитела. И эти антитела – не повреждающего, а защитного характера. Они помогают вовремя распознать беременность внутри полости матки и включить на эту беременность адекватную реакцию, направленную на сохранение и выживание плода. Далее последовало совершенствование этой методики. Где-то на рубеже 70-80-х годов В.И.Говалло на одной конференции в Новосибирске задался вопросом о необходимости пересадки кожного лоскута. Гораздо проще, говорил он, взять из крови мужа лимфоциты (клетки, имеющие на себе высокую концентрацию антигенов тканевой совместимости второго класса) и просто ввести их женщине. И дальнейший результат будет таким же. После конференции с ним связалась профессор Сидельникова, заведующая отделением невынашивания беременности, и предложила начать проводить процедуры иммунизации пациенток предложенным им способом.
И они стали проводить такие процедуры, а их пациентки стали успешно вынашивать беременность. А затем случилось так, что Валентин Иванович поссорился с профессором Сидельниковой, они стали работать отдельно и возникли два способа лимфоцитоиммунизации.
В Центре акушерства и гинекологии процедуру проводили, вводя препарат многократно в небольших количествах.
А по методу Говалло лимфовзвесь вводилась однократно в количестве 200-250 миллионов клеток, и наш Центр выбрал этот метод, хотя оба способа хорошо работают.

СКЛ – смешанная культура лимфоцитов
Валентин Иванович был основным нашим консультантом при создании и открытии клиники, помогал запустить свою методику у нас. Сейчас мы типируем пациентов на гены тканевой совместимости второго класса. При обнаружении такой похожести – делаем иммунизацию лимфоцитами мужа, только мы добавили сюда ещё и смешанную культуру лимфоцитов (СКЛ).
Объясню, почему. Когда ещё я работал на кафедре и учился в аспирантуре, где-то в конце 80-х годов, нашей клинической базой был 7-й роддом, самый близкий к Кремлю, на Воздвиженке. После занятий я шёл в библиотеку имени Ленина и просматривал все новинки в публикациях из разных стран мира.
Одной из них было интересное многотомное «Руководство по акушерству и гинекологии» из Германии, где невынашиванию беременности был посвящен отдельный том. И в этом томе была целая глава по иммунологии невынашивания беременности, где предлагалось использовать смешанные культуры лимфоцитов для выявления пар, которым действительно нужна иммунизация, и отсекать тех, кому не нужна эта процедура. Таким образом я знал про эту дополнительную методику и стал использовать в наших клиниках, хотя многие не применяют её из-за некоторой сложности. У нас в Центре это отдельная программа по аллоиммунному бесплодию.

Иммунологический фактор при невынашивании беременности: роль совпадений по HLA
Но замечу, что не стоит гипертрофировать проблему иммунологического фактора при невынашивании беременности. Да, он значим, но не является единственной проблемой невынашивания.
Здесь немного вернемся опять к истокам генетики. В какой-то момент развития теорий о половом размножении возникла эта идея про совместимость по тканевым антигенам. Потому что половое размножение даёт разнообразие прежде всего по антигенам тканевой совместимости, по антигенам белков иммунной системы. И тогда решили найти такую популяцию, где приветствуется многодетность, где не используют контрацепцию, и где ведут здоровый образ жизни. Чтобы легче было выявить факторы, влияющие на наступление и течение беременности. И нашли подходящую популяцию в виде христианской общины хаттеритов (Гуттерово братство).
В такой популяции имеется полная похожесть супругов по антигенам тканевой совместимости второго класса. И среди их супружеских пар было выявлено, что там увеличен период между началом половой жизни и рождением первого ребёнка; увеличено количество случаев невынашивания беременности; и увеличены интервалы между рождением детей. При этом нет случаев бесплодия. И почти во всех таких супружеских парах более 10-ти детей.
Из этого исследования можно сделать вывод, что всё-таки влияние фактора тканевой совместимости ограничено. Поэтому, когда у нас есть пара с похожестью генов тканевой совместимости (а таких пар всего примерно 15%) в сочетании с невынашиванием беременности, нужно проводить более углубленные обследования по всем направлениям, касающимся невынашивания беременности. Тогда точно может быть выявлена необходимость проведения процедуры лимфоцитоиммунизации.

Продолжение: Внутригеномный конфликт

Источник