Для чего лимфоцитам эпс

Лимфоцит — маленькая круглая клетка с большим ядром и тонким ободком цитоплазмы давно знакома специалистам. Исследователи обнаруживали ее при самых разнообразных событиях, происходящих в организме.

Роль лейкоцитов

При физиологическом обновлении тканей лимфоцит тут как тут; происходит восстановление поврежденных органов, повреждений кожи — он и здесь; в любом воспаленном месте вновь встречаем лимфоцит… Этот представитель клеток белой крови — лейкоцитов практически вездесущ, и ведет он себя порой необъяснимо.

Например, его «сородичи» нейтрофилы, эозинофилы, базофилы и моноциты усиленно трудятся в очаге воспаления; поглощают бактерии, обломки клеток, выделяют протеолитические ферменты, помогающие переваривать мертвую ткань. А лимфоцит как бы стоит в сторонке, не проявляя видимой активности. Так ли это? И чем объясняется его присутствие в этой и других ситуациях?

На эти вопросы смогли ответить лишь в середине нашего века, почти через семь десятков лет после открытия лимфоцитов. Тонкие исследования показали, что лимфоцит вовсе не сторонний наблюдатель. Он ведущий организатор и активный участник всех иммунных, защитных реакций, протекающих в организме.

Параметры лейкоцитов

Эта самая маленькая (диаметр лимфоцита — 5-7 микрон) клетка семейства лейкоцитов оказалась главной среди своих «сородичей»; как выяснилось, от лимфоцитов в значительной степени зависит поддержание численности и специализация всех клеток лейкоцитарного ряда.

Не будь лимфоцитов, другие клетки белой крови не знали бы о том, что в организм проник болезнетворный микроб, вирус, чужеродный белок, ибо функция обнаружения и распознавания генетически чужеродных агентов (антигенов) и «оповещения» об их вторжении возложена на лимфоциты.

Наперечет зная все клетки организма, лимфоциты охраняют его от всего генетически чужеродного. Именно при их участии происходит отторжение чужой ткани при трансплантации. Не щадят лимфоциты и клетки собственного организма, переродившиеся при патологическом процессе или мутации — при случайном изменении их генов.

Этим и объясняется непременное присутствие лимфоцитов при клеточном делении, независимо от того, физиологическими или патологическими причинами оно вызвано. Ведь известно, что мутации чаще всего возникают при делении, размножении клеток, поэтому лимфоциты должны постоянно следить за этим процессом, чтобы в случае появления мутанта организовать быструю расправу над ним.

Но только ли в жестком контроле над генетическим постоянством заключается роль лимфоцитов?

Роль лейкоцитов в восстановлении и делении клеток

Учеными был проведен интересный эксперимент. Лимфоциты животного, в организме которого шел такой активный процесс, как регенерация печени, ввели здоровому животному. И у него начали активно делиться клетки нормальной, неповрежденной печени.

Опыт повторяли снова и снова и получали все тот же поразительный эффект. Ученые предположили, что участие лимфоцитов в процессах клеточного деления обусловлено, не только их обязанностью нести иммунный надзор, но что им присуща также строительная, морфогенетическая функция.

О том, что лейкоциты (и в их числе лимфоциты) оказывают влияние на деление клеток, было известно и раньше. В эксперименте на рану наносили сыворотку, в которой культивировали лейкоциты, и заживление раны шло гораздо быстрее.

Объясняли это так называемой трофической функцией лейкоцитов, считая, что они обогащают сыворотку питательными веществами. Полагали, что, кроме этих веществ, клетки ткани используют для регенерации «обломки» погибающих лейкоцитов.

Сегодня можно с уверенностью сказать, что дело не только в питательных веществах (этот фактор нельзя отрицать полностью), но главным образом в специфическом биологически активном субстрате, способствующем размножению клеток. Какое вещество (а может быть, вещества?) входит в состав этого субстрата, неясно, выделить его пока не удается. Но достоверно установлено, что продуцирует его и переносит «регенерационный стимул» опять жене лимфоцит.

Самое удивительное то, что лимфоциты переносят не просто стимул к делению как таковому. Эта «любопытная» клетка всегда хорошо осведомлена, в каком органе идет регенерация. Лимфоциты животного с регенерирующей печенью вызывают у здоровых животных усиленное деление главным образом печеночных клеток; лимфоциты животного с восстанавливающейся почкой — деление клеток почки реципиента.

Сигнал к размножению клеток лимфоцит переносит и в тех случаях, когда в организме донора происходит усиленное клеточное деление, не связанное с повреждениями какого-либо органа.

Например, гипоксия (недостаток кислорода), как известно, приводит к усиленному образованию эритроцитов — носителей дыхательного пигмента гемоглобина. Так вот, если взять лимфоциты у животного, находящегося в состоянии гипоксии, и ввести их животному, которое не испытывает кислородного голодания, то через некоторое время можно наблюдать у него стимуляцию продукции эритроцитов.

Какие же структуры лимфоцита играют роль запоминающего и воспроизводящего устройства? Пожалуй, это одна из самых интересных и сложных загадок, которые когда-либо загадывал лимфоцит исследователям. Разгадать же ее просто необходимо, ибо есть основания полагать, что это откроет путь к лечению многих болезней.

Как часто в клинической практике врачи сталкиваются с необходимостью повлиять на регенерационные процессы. И лимфоциты могли бы здесь оказать неоценимую помощь. Ведь они обладают высокой мобильностью, имеют широкий доступ практически ко всем тканям и органам и способны передавать свои «навыки» организму, в котором надо стимулировать регенерацию определенной ткани.

Возможно, лимфоциты помогут в какой-то мере решить сложнейшую проблему лечения наследственных заболеваний.

Изучая наследственную патологию — остеопетроз у мышей и крыс, выражающуюся в ненормальном формировании костей и преждевременном их уплотнении, специалисты обнаружили следующий факт. Введение больным мышам и крысам лимфоцитов от их здоровых «братьев и сестер» приводило к нормализации процесса формирования кости.

Правда, при условии подавления активности собственных лимфоцитов больных животных. Разве не поразительно, что наследственный порок развития, каковым является остеопетроз, удалось, пусть в эксперименте, исправить с помощью обыкновенных лимфоцитов!

Тогда что мешает широко использовать морфогенетические свойства лимфоцита в клинике?

Мешает… лимфоцит. Среди клеток нашего организма он самый мощный носитель антигенов, следовательно, попадая в чужой организм, вызывает сильный иммунный ответ. А как же эксперименты? Дело в том, что проводились они на животных чистых линий. Все животные в пределах одной такой линии похожи друг на друга даже больше, чем две капли воды; их лимфоциты (как и все прочие клетки) абсолютно идентичны.

Лимфоциты же разных людей отличаются по своим антигенным свойствам и, следовательно, без соответствующего подбора не могут быть перелиты от одного человека другому. И, тем не менее, создаваемая в нашей стране служба типирования — подбора совместимых по антигенам донора и реципиента позволяет надеяться на частичное решение этой проблемы.

Кроме того, специалисты предполагают, что биологически активный субстрат – носитель «регенерационного стимула» окажется не столь высоко антигенным, как лимфоцит.

Поделиться ссылкой:

Процедура ЛИТ – чем она потенциально опасна, как избежать риски,и почему лимфоцитоиммунотерапия в ЦИР абсолютно безопасна рассказывает Игорь Иванович Гузов, акушер-гинеколог, к.м.н., основатель “Центра иммунологии и репродукции”.

Вопрос: «Скажите, насколько опасна процедура ЛИТ? Слышала, что она запрещена во всем мире. Нельзя ли вместо этого принимать Метипред?»

Во-первых, она не запрещена практически ни в одной стране мира. В тех странах, где она не выполняется сейчас, она просто находится в подвешенном состоянии до дополнительных разрешений.

Что такое процедура ЛИТ

Что такое процедура ЛИТ, и чем она может быть опасна? Лимфоцитоиммунотерапия заключается в том, что мы выделяем из крови мужа определенное количество лимфоцитов (белых кровяных клеток), которые обладают достаточно высокой иммуногенностью. И эти очищенные клетки вводим в организм женщины, для того чтобы обеспечить защиту от невынашивания беременности.

Потенциальные риски ЛИТ

Могут ли быть потенциальные риски? Могут быть риски, если вы неправильным образом проводите эту процедуру, либо, если те люди, которые берутся за проведение этой процедуры, не знакомы с теми принципами безопасности, которые должны соблюдаться обязательно.

Какие опасности существуют?

Первая опасность, которая существует, поскольку мы имеем дело с препаратами крови – это передача инфекции, которая может быть у мужа, жене вместе с этим лимфоцитами.

Наиболее опасной является передача гепатитов. Наиболее частой является передача гепатитов, если эту процедуру делать неправильно. Но может быть и передача СПИДА.

Как мы ставим диагноз гепатита или ВИЧ-инфекции? Мы ставим чаще всего этот диагноз по наличию антител. Когда появляются антитела? Антитела появляется не сразу, а после того, как формируется иммунный ответ. Если брать вирус ВИЧ, то этот иммунный ответ может формироваться до полугода. То есть человек может находиться в острой инфекции, он может быть заражён опасной для женщины инфекцией, но антител никаких у него не будет, если он сдаст анализ, этот анализ может быть хорошим. И для того, чтобы исключить инфицирование пациентки лимфоцитами, которые она получает от мужа, очень важен так называемый карантинный период. Мы его свято соблюдаем.

То есть пациент (муж пациентки) сдаёт кровь, мы выделяем лимфоциты из этой крови, и эти лимфоциты вводим только тогда, когда человек сдал через полгода контрольные анализы. Если в контрольных анализах, сданных через полгода отсутствуют признаки какой-либо инфекции, на которую мы проверяем, только тогда мы можем использовать эти лимфоциты для иммунизации жены.

И, таким образом, лимфоциты, сданные полгода назад, становятся безопасными. Потому что мы точно знаем, что если бы они были взяты в инкубационный период инфекции, мы тогда получили бы положительный анализ через полгода, когда человек сдает анализ.

Вот почему важно, когда мы делаем эту процедуру у себя, исключить риски, которые связаны с инфицированием, то есть это исключается  путем использования вот этого карантинного периода.

Дальше, что еще может быть потенциально опасным? Потенциальным может быть иммунизация тромбоцитами. Дело в том, что в крови, которую сдает человек, присутствуют разные виды кровяных клеток. И самыми маленькими клетками являются тромбоциты.

И поэтому, когда идет первичная сепарация одних элементов крови и других элементов крови, то в материал после сепарации могут попасть тромбоциты. Если примесь тромбоцитов мужа будет присутствовать в препарате, который вводится жене, то тогда может произойти иммунизация тромбоцитами. И у женщины может развиться аутоиммунная тромбоцитопения. То есть состояние, которое бывает при, допустим, переливании разногрупповой крови, но только на уровне тромбоцитов.

Поэтому очень важно, чтобы препарат, который используется для иммунизации женщины, на 100% был очищен от тромбоцитов. Как это достигается? Как делаем мы: муж сдает кровь, и она попадает в полностью закрытую систему. Внутри закрытой системы происходит центрифугирование, и после него происходит разделение на эритроциты, которые опускаются, и такой поверхностный белесый слой, он называется баффи скин «буйволова кожа». Это как раз тот слой, где имеются белые кровяные клетки и тромбоциты. Мы отделяем этот слой, то есть взвесь лимфоцитов и небольшой примеси других лейкоцитов и тромбоцитов, и используем их для дальнейшей очистки и дальнейшей обработки. То есть вся красная кровь уничтожается. Она нам не нужна. Нам нужны только лимфоциты.

И вот очень значимо, что на следующем этапе происходит тонкая отмывка вот этой взвеси от тромбоцитов. Тромбоциты отмываются на 100%. Потому что здесь уже идет центрифугирование на других скоростях, которые сепарируют эти белые кровяные клетки от тромбоцитов. И на выходе мы имеем смесь, полностью отделённую тромбоцитов. То есть там будут лейкоциты, на 90% состоящие из лимфоцитов, небольшое количество гранулоцитов (просто их невозможно сепарировать вот таким способом друг от друга), там будут отсутствовать тромбоциты, и там будут присутствовать единичные эритроциты, которые не значимы.

То есть на весь препарат будут присутствовать единичные эритроциты (полностью отделить от эритроцитов невозможно). Это полностью исключает какую-либо иммунизацию по эритроцитам или по тромбоцитам.

Второй этап, очень важный, и это уже технологически касается самого процесса – мы отделяем эту лейкоцитарную взвесь от тромбоцитов, это  является ключевым моментом.

И следующая потенциальная опасность, которая может быть, когда мы вводим большую дозу лимфоцитов в организм матери, это реакция «трансплантат против хозяина». Потому что мы вводим иммунные клетки, и если мы вводим большое количество живых клеток, эти иммунные клетки могут начать, собственно говоря, «жить своей собственной жизнью» и каким-то образом участвовать в атаках, направленных на организм женщины.

Это исключается тем, что перед тем как мы вводим уже готовую дозу для иммунизации, мы обучаем их мягкой дозой ультрафиолета для того, чтобы прекратить жизнедеятельность большей части клеток. И таким образом, сохраняя все свои иммуногенные свойства, эти клетки становятся нечувствительными к иммунной атаке. Они выступают только как мишень для иммунной атаки женщины, и защититься они не могут.

Процедура ЛИТ в ЦИР

И вот если проводить процедуру лимфоцитоиммуннотерапии по той методике, которую делаем  мы, абсолютно исключены все 3 опасности. То есть исключена опасность инфицирования, исключена опасность иммунизации тромбоцитами в случае несовпадения по группам кровитромбоцитов, и исключена реакция трансплантат против хозяина.

И вот у нас эта методика используется уже почти 25 лет, и не было ни одного(!) осложнения ни по одному из этих трех составляющих.

И для того, чтобы еще больше уменьшить риск осложнений, мы это делаем по методике основоположника всей этой методики подсадки кожного лоскута и иммунизации лимфоцитами мужа, это наш очень крупный иммунолог – Валентин Иванович Говалло, который был нашим первым консультантом, когда мы только создавали наш центр в 1996 году. И когда мы разговаривали с Валентином Ивановичем, я спрашивал, сколько лимфоцитов нужно  вводить? 200-250 миллионов. Сколько раз? Один раз нужно ввести, но только, чтобы доза была 200-250 миллионов.

И он, собственно говоря, эту методику запатентовал. Эта методика описана, можно ее взять прочитать в патентной библиотеке. Но мы, конечно, используем эту методику модифицировано, потому что там описывается методика выделения лимфоцитов, которая применяется в иммунологии, то есть отстаивание, центрифугирование и так далее.

Мы очищаем эту кровь и выделяем по той методике, которая используется в современной трансфузиологии. То есть мы сепарируем всё это в закрытых системах, на разных скоростях. Отделяем вначале эритроциты, потом отделяем тромбоциты, и таким образом, эта методика, если сделать ее правильно с соблюдением всех правил, абсолютно безопасна. Мы не видели ни одного осложнения у наших пациенток на протяжении больше, чем 20 лет.

Поэтому, в принципе, я не могу отвечать за другие клиники, не могу отвечать за другие центры. Потому что сейчас приезжают пациентки из Белоруссии, которым делали иммунизации. Я смотрю протоколы: протоколы вроде бы хорошие, интересные. По количеству клеток, которые делались, тоже вроде хорошие. То есть я так понимаю, что они воспроизвели во многом нашу методику. И тогда, в общем-то, это всё, скорее всего, безопасно.

Но я могу отвечать только за нашу клинику, то есть, если иммунизация делается нами в наших руках, то ни разу за всё это время не было никаких осложнений. Поэтому я считаю, что эта методика абсолютно безопасна.

ЛИТ в других странах

Вот статья 2018 года, то есть вышла февральском или мартовском номере одного из западных журналов. Бразильская статья. Бразилия – мощнейшая страна, богатая, одна из  стран, которые получили обозначение БРИК. В Бразилии активно делают ЛИТ, в Китае всё это активно делается, в Японии, в Корее. То есть проблемы возникают у тех пациентов, которые живут в США, которые вынуждены летать на Багамские острова, где можно это сделать. На Багамских островах можно сделать всё. Если считать часами лёта, то за 2 часа прилетел на Багамские острова – тебе укололи – и ты улетел оттуда. Ездят в страны Латинской Америки, по-моему в Мексику, где можно всё это сделать. Потому что там это не запрещено.

Из Европы едут к нам. Едут в Венгерскую республику, поскольку там находится руководитель Международной организации иммунологии и репродукции . Ее авторитет настолько велик, что там можно делать. В Польше делают.

А так, очень многие из западных стран приезжают к нам, потому что, в общем-то, получается, если ты не можешь это сделать там, это можно сделать здесь.

Я говорю, что мы абсолютно уверены в безопасности этой методики, если соблюсти все  факторы.