Cd типирование лимфоцитов периферической крови это

[20-077]
Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD56

4035 руб.

Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD56). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Синонимы русские

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, субпопуляции лимфоцитов.

Синонимы английские

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Метод исследования

Проточная цитометрия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Иммунофенотипирование – характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов:

Т-лимфоциты (CD3+CD19-);
Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+);
Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3+CD8+CD45+);
истинные “натуральные киллеры” (NK-клетки) (CD3-CD56+CD45+);
В-лимфоциты (CD19+CD3-);

– но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток(Т-NK-клетки) (CD3+CD56+CD45+);
NK-клетки, экспрессирующие α-цепь антигена CD8 (CD3-СD8+CD45+).

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
урогенитальные инфекции;
грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
рецидивирующий герпес различной локализации;
гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты.

С аллергическим (атопическим) синдромом:

атопический дерматит;
нейродермит;
экзема с инфекционным компонентом;
тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

ревматоидный артрит;
рассеянный склероз;
диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
аутоиммунный тиреоидит;
неспецифический язвенный колит.

С иммунопролиферативным синдромом:

опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов	Повышение показателя	Снижение показателя
T-лимфоциты (CD3+CD19-)	Острые и хронические инфекции; гормональный дисбаланс; длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия); прием биологически активных добавок; интенсивные занятия спортом; беременность; Т-клеточные лейкозы.	Некоторые виды инфекций; иммунодефицитные состояния; алкогольный цирроз печени; карцинома печени; аутоиммунные заболевания; прием иммуносупрессивных препаратов.
Т-хелперы (CD3+CD4+CD45+)	Ряд аутоиммунных заболеваний; гормональный дисбаланс; некоторые инфекции; отдельные Т-клеточные лейкозы; отравление солями бериллия.	Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита); алкогольная болезнь печени; аутоиммунные заболевания; прием иммуносупрессивных препаратов или стероидов.
Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+)	Некоторые вирусные инфекции; ряд Т-клеточных лейкозов; наркоз; острая фаза аллергии; ряд аутоиммунных патологий.	Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний; иммуносупрессивная терапия.
В-лимфоциты (CD19+CD3-)	Ряд аутоиммунных патологий; стресс; В-клеточные лимфомы; длительная экспозиция формальдегидом.	Гипореактивность, перераспределение в очаги воспаления; общий вариабельный иммунодефицит; наследственный иммунодефицит; внутривенное введение иммуноглобулинов; алкогольный цирроз печени.
“Натуральные киллеры” (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+)	Фаза восстановления после вирусных инфекций (гепатит В, С); ряд аутоиммунных заболеваний; онкологические заболевания; беременность; алкогольный цирроз печени.	Ряд инфекций; ряд аутоиммунных заболеваний; интенсивное курение; иммуносупрессивная терапия и терапия стероидами.
Т-“натуральные киллеры”, НК-Т (CD3+CD56+CD45+)	Длительные хронические воспалительные процессы; тяжелое течение воспалительных процессов; длительная персистенция антигена в организме.	Не имеет диагностического значения.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

Важные замечания

Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
Следует отметить, что оценка показателей в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.

Литература

Хаитов, Р.М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р.М. Хаитова, Н.И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
Хаитов, Р.М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
Зуева Е.Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе /Е.Е Зуева, Е.Б. Русанова, А.В. Куртова, А.П. Рыжак, М.В. горчакова, О.В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО «издательство «Триада», 2008. – 60 с.
Кетлинский, С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А.А. Иммунология : учебник / А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
Хаитов, Р.М. Иммунология : атлас / Р.М. Хаитов, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
Хаитов, Р.М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
Хаитов, Р.М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4–6.
Whiteside, T.L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T.L. Whiteside, R.B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125–133.
Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539–544.
Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337–1343.
Никитин, В.Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотокси ческих лимфоцитахна различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В.Ю. Никитин, И.А. Сухина, В.Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65–71.
Boettler, T. T cells with CD4+CD25+ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8+ T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. − 2005. − Vol. 79, N 12. −P. 7860–7867.
Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. − 2005. − Vol. 65, N 6. − P. 2457–2464.
Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4+CD25+ regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. − 2005. −Vol. 6, N 4. − P. 345–352.
Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. – 2006. − Vol. 36. − P. 1357–1366.
Хайдуков С.В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека и их нормативные значения (метод многоцветного цитометрического анализа) /Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян А.А., Черешнев В.А. // Мед. иммунология. – 2009. -Т. 11 (2-3). – С. 227-238.

Источник

Иммунограмма (Иммунный статус)(CD-типирование лимфоцитов периферической крови, общий анализ крови)

Код: 14.02.001

Биоматериал: кровь с EDTA

Срок: 5 р.д.

Прием биоматериала по данному исследованию может быть отменен за 2-3 дня до официальных государственных праздников, в связи с технологической особенностью производства! Информацию уточняйте в контакт-центре.

Анализы принимаются с понедельника по четверг с 7 утра до 19:30

В состав данного исследования входит: 01.00.003 Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой (5DIFF)

Иммунология — это лабораторный анализ крови, в процессе которого исследуются основные компоненты иммунной системы человека. Анализ на иммунный статус позволяет оценить процентное соотношение клеток и их общее количество, а также общие показатели крови и концентрацию в ней иммуноглобулинов.

Показатели, входящие в данный тест:

лимфоциты (относит);
лимфоциты (абсолют);
Т-лимфоциты CD3 (относит);
Т-лимфоциты CD3 (абсолют);
лейкоцитарно-Т-ЛФ индекс;
Т-хелперы CD3/4 (относит);
Т-хелперы CD3/4 (абсолют);
Т-цитотокс CD3/8 (относит);
Т-цитотокс CD3/8 (абсолют);
иммунорег индекс CD4/CD8;
дубль-клетки CD4+/CD8+%;
дубль-клетки CD4+/CD8+(абсолют);
NK-клетки CD16,CD56 (относит);
NK-клетки CD16,CD56 (абсолют);
Т-NK-клетки CD16,CD56 (относ);
Т-NK-клетки CD16,CD56 (абсолют);
В-лимфоциты CD19+ (относит);
В-лимфоциты CD19+ (абсолют);
Актив Т-лимф CD3/HLA-DR (относит);
Актив Т-лимф CD3/HLA-DR (абсолют);
0-лимфоциты %;
0-лимфоциты (абсолют).

Показания к анализу крови на иммунный статус

Пройти комплексную иммунографию необходимо при:

болях и напряженности в мышцах, возникающих произвольно, без физических нагрузок;
увеличенных лимфоузлах;
инфекционных заболеваниях, возникающих чаще, чем 6 раз в год;
потере веса без весомых на то причин;
стабильно высоком артериальном давлении на протяжении минимум 14 дней;
симптомах общего дефицита иммунитета — оппортунистических инфекциях, грибковых заболеваниях на слизистых оболочках;
частых рецидивах дерматологических и гнойных заболеваний.

Сдать кровь на исследование иммунологического статуса также стоит пациентам с онкологическими заболеваниями, ВИЧ-инфекцией и тем, кто принимает иммунодепрессанты. Чтобы получить максимально точные результаты анализа, необходимо накануне сбора крови из вены отказаться от жирной пищи и алкоголя. Также избегайте сильных физических, эмоциональных нагрузок и курения.

Где сдать иммунограмму и максимально быстро получить готовые результаты?

В наших центрах цена на иммунограмму доступна каждому — записывайтесь на процедуру забора крови на любое удобное для вас время.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ

Кровь берется из вены. Необходимо соблюдать общие рекомендации:

кровь сдается утром натощак;
допускается употребление воды без газа;
накануне анализа следует отказаться от алкоголя, исключить физическое и эмоциональное перенапряжение;
отказаться от курения за 30 минут до исследования;
не стоит сдавать кровь в период приема медикаментов, если врач не назначил иное.

Источник

Метод определения
Иммунофенотипирование (проточная цитофлюориметрия, безотмывочная технология)

Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)

Синонимы: Иммунофенотипирование; клеточный иммунитет; субпопуляции лимфоцитов. Immunophenotyping; Human Immune System; Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Краткое описание анализа крови «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16,56»

В профиль входят следующие показатели:

Лимфоциты, абсолютное значение,
Т-лимфоциты (CD3+),
Т-хелперы (CD3+CD4+),
Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+),
Иммунорегуляторный индекс (CD3+CD4+/CD3+CD8+),
В-лимфоциты (СD19+), ЕК-клетки (CD3-CD16+CD56+),
Т-ЕК-клетки (CD3+CD16+CD56+).

Какие параметры оцениваются в исследовании «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16,56»

Лимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Физиологическая роль их может быть различной. Эти структуры являются мишенями при иммунофенотипировании лимфоцитов как антигенные маркёры различных субпопуляций, присутствие которых определяют с помощью меченых моноклональных антител. Поверхностные антигенные структуры на клетках, выявляемые моноклональными антителами, назвали кластерами дифференциации (CD, clusters of differentiation). Кластерам дифференциации в целях стандартизации присвоены определённые номера. Используя флюорохром-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определёнными CD, можно произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, следить за течением и прогнозировать дальнейшее развитие заболевания.

Основные субпопуляции лимфоцитов

Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они участвуют в обеспечении клеточного иммунного ответа и контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ.

Т-хелперы (от англ. «to help» – помогать) – разновидность Т-лимфоцитов, несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками, участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины.

Цитотоксические Т-клетки – распознают фрагменты антигена на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.

В-лимфоциты (от лат. «bursa» – сумка, по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) – проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.

ЕК-клетки (естественные киллерные клетки, или натуральные киллеры) – клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням. ЕК-клетки не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам.

Т-ЕК (ЕКТ)-клетки – это клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.

Кластеры дифференциации антигенов

CD3 – поверхностный маркёр, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. По функциям относится к семейству белков, формирующих комплекс мембранной передачи сигнала, связанный с Т-клеточным рецептором.

CD4 – характерен для хелперных Т-клеток; представлен также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II, экспрессированными на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.

CD8 – характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, который облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I (major histocompatibility complex – главный комплекс гистосовместимости).

CD16 – используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.

CD19 – присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках, считается самым ранним маркёром B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-клеток.

CD56 – прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

Литература

Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. – Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с.
Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. – М.: Практика, 2000. – 806 с.
Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с.
Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ – Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 – 432 с.
Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. – М.: Мир, 2000 — 592 с
Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 – 752 с.
Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013.
Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 – 1798 p.

Источник