Биопсия лимфоузла с игх исследованием

Метод определения
Гистологическое исследование биоптата согласно гистологической классификации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) с окрашиванием гематоксилином-эозином.
ИГХ-исследование с применением спектра антител (до пяти антител) (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).

Исследуемый материал
Смотрите в описании

Комплексное исследование биоптатов при лимфопролиферативных заболеваниях, включающее морфологическое описание и оценку экспрессии спектра опухолевых маркеров, для определения тактики лечения и прогноза.

Лимфомы относят к заболеваниям кроветворной ткани – гемобластозам, среди которых выделяют лейкозы и гематосаркомы. Для лимфом характерно развитие очаговых опухолевых разрастаний из элементов кроветворной ткани без поражения костного мозга (лимфатического узла) на ранних стадиях. Этиология лимфом окончательно не установлена. Риск развития неходжкинских лимфом ассоциируется с инфекционными агентами (вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ), вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), человеческим Т-клеточным лимфотропным вирусом типа I), факторами внешней среды (ионизирующим излучением, пестицидами), первичным и вторичным (ятрогенным) иммунодефицитом, аутоиммунными заболеваниями.

В соответствии с российскими клиническими рекомендациями по диагностике и лечению лимфопролиферативных заболеваний (2013), диагноз устанавливают на основании морфологического исследования биопсийного или операционного материала с помощью гистологических и иммуногистохимических методов. Морфологическое исследование должно выполняться патологом-экспертом и соответствовать критериям текущей классификации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ). Объем иммуногистохимического исследования определяет врач-патологоанатом при гистологическом изучении биоптата. В отдельных случаях проводятся молекулярно-биологическое и генетическое исследования. Цитологическое исследование пунктатов или мазков-отпечатков лимфоузла или других опухолевых очагов не является достаточным основанием для нозологической верификации лимфом.

Пункционная биопсия или трепанобиопсия опухоли с диагностической целью могут быть выполнены только в исключительных случаях при необходимости немедленного лечения.

Дифференциальная диагностика наиболее часто встречающихся лимфом с учетом классификации ВОЗ (2008) и российских клинических рекомендаций по диагностике и лечению лимфопролиферативных заболеваний (2013).

1. Лимфома Ходжкина

Заболеваемость лимфомой Ходжкина (ЛХ) в России составляет 2,1 случая на 100 тысяч населения в год. Заболевание возникает в любом возрасте, но преимущественно в интервале 16-35 лет, в этой возрастной группе в России преобладают женщины. Критерии диагноза: все варианты классической ЛХ характеризуются единым иммунофенотипом: CD30+, CD15+, PAX-5+. В опухолевых клетках может обнаруживаться вирус Эпштейна-Барр (LMP1/EBER).

2. Фолликулярная лимфома

Фолликулярная лимфома (ФЛ) занимает второе место по частоте всех злокачественных лимфопролиферативных заболеваний взрослых. Этот показатель значительно варьирует в разных географических регионах, зависит от этнической и расовой принадлежности больных. Медиана возраста пациентов составляет 60 лет, соотношение мужчин и женщин приблизительно 1:1,7. Иммунофенотип: В-клеточная лимфома с иммунофенотипом CD20+, CD10+/-, BCL-2+, BCL-6+, CD3-, CD5-, CD23+/-, CD43-, сyclin D1-. В редких случаях ФЛ может быть BCL-2-негативная. В таком случае рекомендовано цитогенетическое исследование для выявления t(14;18) или реаранжировки BCL-2. Пролиферативный индекс обычно не превышает 20%, Ki-67 > 30% ассоциируется с неблагоприятным прогнозом.

3. Лимфома маргинальной зоны

Лимфомы маргинальной зоны (ЛМЗ) представляют собой группу злокачественных В-клеточных новообразований, происходящих из В-лимфоцитов, которые в норме встречаются в маргинальной зоне в фолликулах лимфатических узлов (ЛУ), селезенки и лимфатических тканей. Выделяют три типа ЛМЗ:

нодальную лимфому;
экстранодальную MALT (Mucosa-Associated Lymphoid Tissue – мукозоассоциированную) лимфому;
лимфому селезенки.

Наиболее часто при экстранодальных MALT-лимфомах поражается желудочно-кишечный тракт (около 50% случаев). Среди органов желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) на долю MALT-лимфомы желудка приходится до 80% случаев. Существует доказанная связь между инфицированностью Helicobacter pylori и MALT-лимфомой желудка, Borrelia burgdorferi и ЛМЗ кожи, Chlamydophila psittaci и ЛМЗ орбиты, Campylobacter jejuni и IPSID (Immunoproliferative Small Intestine Disease – иммунопролиферативным заболеванием тонкой кишки), вирусом гепатита С и ЛМЗ селезенки и негастральными MALT-лимфомами. Иммунофенотип: иммунофенотип нодальных и экстранодальных В-клеточных лимфом из клеток маргинальной зоны идентичен: CD20+, CD5-, CD10-, CD23-, BCL-2+/-, BCL-6-, MUM 1+. В сложных случаях при преобладании диффузного роста рекомендуется дополнительное исследование экспрессии CD38(-) и CD44(+).

4. Диффузная крупноклеточная

В-клеточная лимфома Диффузная крупноклеточная B-клеточная лимфома (ДВКЛ) является наиболее распространенным вариантом лимфом взрослых (30% от всех неходжкинских лимфом). Заболеваемость составляет 4-5 случаев на 100 тысяч населения в год. Риск развития болезни увеличивается с возрастом (медиана заболеваемости – 63 года). Мужчины и женщины болеют почти с равной частотой. Иммунофенотип: экспрессия пан-В-клеточных антигенов CD20+, CD79a+, PAX 5+, CD45+, CD3-. ДВКЛ, как правило, характеризуется высокой митотической и пролиферативной активностью. Ki-67 экспрессируется в широком диапазоне: от 40 до 90%, в отдельных наблюдениях превышает 90%. При наличии технической возможности в алгоритм диагностики может включаться генетическое исследование с определением наличия перестройки генов MYC (до 10% случаев), BCL-6 (до 30% случаев), t(14;18)(q32;q21).

5. Лимфома из клеток мантии

Лимфома из клеток мантии (ЛКМ) составляет около 6% от числа лимфатических опухолей. Болеют преимущественно пожилые мужчины (медиана заболеваемости – 65-75 лет, соотношение мужчин и женщин – 3:1). Опухоль клинически и морфологически гетерогенна, в большинстве случаев (70-80%) в дебюте выявляется генерализованное поражение ЛУ, селезенки и экстранодальных областей. Это агрессивная лимфома, при которой общая выживаемость больных составляет 3-5 лет. Заболевание характеризуется коротким временем до прогрессирования, первый рецидив обычно химиорезистентен. Иммунофенотип: CD20+, CD5+/CD43+, сyclin D1+, BCL-2+, CD3-, CD23- (редкие случаи ЛКМ могут экспрессировать CD10, CD23, BCL-6). Индекс пролиферации менее 30%, как правило, ассоциируется с благоприятным течением заболевания, при бластоидном варианте он может достигать 80-90%. В сложных диагностических случаях целесообразно выполнение цитогенетического/FISH-исследования для выявления t(11;14). В редких случаях при типичной клинической и иммуноморфологической картине отсутствуют t(11;14)(q13;q32) и гиперэкспрессия сyclin D1, имеется гиперэкспрессия cyclin D2 или cyclin D3. В случаях cyclin D1-негативных лимфом из клеток мантии можно дополнительно использовать антитела к p27.

6. Нодальные Т-клеточные лимфомы

Редкая группа заболеваний, которая характеризуется патобиологической гетерогенностью и составляет около 15% от всех лимфом. Вне зависимости от особенностей своего развития и течения, за редким исключением, это агрессивные лимфомы с плохим прогнозом. Наиболее распространенные формы: – периферическая Т-клеточная лимфома. Иммунофенотип: CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD7+, CD8+, с признаками аберрантности иммунофенотипа (утратой некоторых из них), часть клеток может экспрессировать CD30. – ангиоиммунобластная Т-клеточная лимфома. Иммунофенотип: опухолевые клетки экспрессируют пан-Т-клеточные маркеры, CD4+ преобладают над CD8+. Возможна утрата какого-либо из пан-Т-клеточных антигенов как проявление аберрантного фенотипа. Вариабельное количество опухолевых Т-клеток экспрессирует CD10, BCL6. Наиболее специфичным, но менее чувствительным маркером для данного варианта лимфомы является наличие антител к CXCL13. – анапластическая крупноклеточная лимфома (АККЛ). Иммунофенотип: ключевым иммунофенотипическим признаком является экспрессия CD30 и полиморфная/анаплазированная морфология. Опухолевые клетки имеют аберрантный фенотип с утратой некоторых Т-клеточных антигенов. В части случаев не удается доказать Т-клеточный иммунофенотип (так называемые 0-клеточные АККЛ). Часто обнаруживается экспрессия цитотоксических молекул (TIA-1, granzyme В, perforin). Экспрессия CD45 и EMA вариабельна.

7. Хронический лимфолейкоз

Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) – самый частый вид лейкозов у взрослых. Частота его в европейских странах составляет 4:100 тысяч населения в год и непосредственно связана с возрастом. У лиц старше 80 лет она составляет более 30:100 тысяч человек в год. Медиана возраста на момент установления диагноза в европейских странах – 69 лет. В России ХЛЛ выявляется реже и медиана возраста на момент установления диагноза меньше, соразмерно меньшей продолжительности жизни россиян. Иммунофенотип: ХЛЛ характеризуется гетерогенной экспрессией CD20, коэкспрессией CD5, CD23, CD43.

Материал для исследования: биоптат опухоли, фиксированный в парафиновом блоке .

Литература

Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2007 г. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. 2009;20(3):8-138.
Научная библиотека диссертаций и авторефератов disserCat https://www.dissercat.com/content/morfologicheskaya-i-immunogistokhimicheskaya-differentsialnaya-diagnostika-limfomy-khodzhkin#ixzz41vK9JJCf.
Росcийские клинические рекомендации по диагностике и лечению лимфопролиферативных заболеваний. Под руководством профессора И.В. Поддубной, профессора В.Г. Савченко. – М.: Изд. «Медиа Медика».2013. https://npngo.ru/Attachments/SiteContent/Recomendacii.pdf.
Behringer K., Thielen I., Mueller H. et al. Fertility and gonadal function in female survivors after treatment of early unfavorable Hodgkin lymphoma (HL) within the German Hodgkin Study Group HD14 trial. Annals of Oncology. 2012;23(7):1818-1825.
Buske C., Hoster E., Dreyling M. et al. The Follicular Lymphoma International Prognostic Index (FLIPI) separates high risk from intermediate or low risk patients with advanced stage follicular lymphoma treated front-line with Rituximab and the combination of Cyclophosphamide, Doxorubicin, Vincristine and Prednisone (R-CHOP) with respect to treatment outcome. Blood. 2006;108:1504-1508.
Engert A., Haverkamp H., Kobe C. et al. Reduced-intensity chemotherapy and PET-guided radiotherapy in patients with advanced stage Hodgkin’s lymphoma (HD15 trial): a randomised, open-label, phase 3 non-inferiority trial. Lancet. 2012;379(9828):1791-1799.
Engert A., Plutschow A., Eich H.T. et al. Reduced treatment intensity in patients with early-stage Hodgkin’s lymphoma. New England Journal of Medicine. 2010;363:640-642.
Federico M., Bellei M., Marcheselli L. et al. Follicular lymphoma international prognostic index 2: a new prognostic index for follicular lymphoma developed by the international follicular lymphoma prognostic factor project. Journal of Clinical Oncology. 2009;27:4555-4652.
Harris N.L., Stein H., Sarah E. et al. New approaches to lymphoma diagnosis. Hematology. 2001:194-220.
Meyer R.M., Gospodarowicz M.K., Connors J.M. et al. ABVD Alone versus Radiation-Based Therapy in Limited-Stage Hodgkin’s Lymphoma. New England Journal of Medicine. 2012;366:399-408.
Nogova L., Reineke T., Brillant C. et al. Lymphocyte-predominant and classical Hodgkin’s lymphoma: a comprehensive analysis from the German Hodgkin Study Group. Journal of Clinical Oncology. 2008;26:434-439.

Источник

Биопсия лимфоузла – это диагностический процесс, подразумевающий сбор биологического материала (биоптата) для проведения анализов. Процедура болезненна, но результативна – 91% постановления точных диагнозов. Она проводится при раке, подозрениях на туберкулёз, онкологию: у человека лимфоузлы уплотняются и увеличиваются в размерах. Код операции медицинского перечня «биопсия» – А11.

Лимфатические узлы – части лимфатической системы. Система представляет собой небольшие, круглые комочки, связанные особыми сосудами с жидкостью под названием лимфа. Лимфатические узлы у здорового человека не прощупываются, при воспалении – увеличиваются.

При каких случаях проводится биопсия

Проводится диагностика исключительно, если:

врачи имеют подозрения на образования злокачественного типа;
не наблюдается изменений лимфоузла при безрезультатном проведении терапии в течение длительного периода;
симптомы соответствуют развитию метастазов;
болезненные воспаления появились на шее, под подмышкой;
у пациента наблюдается лимфогранулематоз или саркоидоз;
у человека в организме проходят воспалительные процессы без видимых причин;
размер узла больше 1 см;
пациент не жалуется на болезненные ощущения в области расположения узлов, одновременно присутствуют основные признаки интоксикации организма;
изменения в лёгких, которые невозможно проследить с помощью бронхоскопии.

Исследование показывает наличие метастазов у человека, особенности протекания болезни, уровень заражения.

Метастазы раковых клеток

Противопоказания

Эта процедура связана с хирургическим вмешательством, обнаруживаются противопоказания, их важно учитывать, избегая осложнений:

Нагноения в необходимых узлах и ближайших местах.
Плохая свёртываемость крови.
Искривление позвоночника.
Температура тела выше нормы.

Важным пунктом является проверка состояния кожи пациента, чтобы избежать всевозможных нарушений, осложнений.

Как проводится биопсия в лабораторных условиях?

Цель биопсии – определение качества опухоли поражённой области. Потребуется пройти гистологический анализ. Подозрительные клетки рассматривают под микроскопом. Здоровые сохраняют структуру, а больные, как правило, разрушаются.

Ткань разрезают на небольшие кусочки, потом окрашивают. Этап осуществляется автоматизированными приборами с помощью специальных ванночек, остальное зависит от уровня профессионализма патологоанатома – именно он способен вынести вердикт. В зависимости от нарушений у структуры клеток врач определяет вид образования, его качества, иногда возможно постановление диагноза.

Если светового микроскопа недостаточно для обследования клеток, подключают иммуногистохимическое исследование. В указанном случае кусочки ткани обрабатывают различными жидкостями или веществами, направленными на борьбу с поражёнными клетками. При срабатывании какого-либо средства под микроскопом появляются отчётливые гранулы жёлтого цвета. Метод с использованием специальных веществ широко распространён для выявления меланом.

Иногда, исследуя сложные случаи, врачам приходится прибегать к электронным микроскопам, чтобы разобраться в изменениях, произошедших у пациента. Способ обнаруживает преимущества и недостатки. Электронный микроскоп увеличивает в тысячу раз, что показывает отдельные клетки и крупные молекулы. Однако способ позволяет рассматривать только пару клеток. Очень важен правильный забор ткани на анализ, чтобы избежать ошибок.

Подготовка к проведению процедуры

До проведения биопсии пациенту следует тщательно обследовать организм. Для начала важно проконсультироваться с врачами: кардиологом, онкологом, хирургом. Далее пройти УЗИ, электрокардиограмму, рентген, сдать кровь на общий анализ. Пациент отказывается от лекарств, влияющих на уровень свёртываемости крови, от солёной, жирной, острой пищи.

Методы проведения

Сегодня известен ряд действующих методов проведения биопсии.

Аспирационная тонкоигольная

Процедура является наиболее безопасной, её проводят с помощью полой тонкой иголки. Обычно аспирационный вид используется для взятия биологического материала из лимфоузлов, располагающихся над ключицей и челюстью, шея – подходящий участок для метода.

Эта методика подходит исключительно для таких случаев, где врачу важно взять небольшое количество биоптата. Пациенты переносят процедуру спокойно, редко случаются осложнения.

Пункционная

Процедура выполняется полой иглой, оборудованной мандреном для забора и удержания большого количества материала. Пункционный вид работает исключительно при необходимости получения биологического материала из средостения, к примеру, в паху, из молочной железы. Диагностика переносится пациентами практически безболезненно, под местной анестезией.

Эта методика создана для взятия материала в большом количестве, чтобы провести тщательное гистологическое исследование, выявить проблему.

Взятие биопсии

Открытая

Второе название – эксцизионная. Процедура отличная от вышеописанных технологией проведения. Открытый метод заключается в полном удалении подозрительных воспалённых лимфоузлов. Эксцизионную операцию проводят при расположении узла в труднодоступном месте.

Выполняется небольшой разрез, удаляется поражённый участок, после накладываются швы.

Пока идёт операция, ассистенты проводят срочный анализ необходимого материала. Эксцизионный вид биопсии длится в течение часа, считается самым надёжным.

Помните, гистологический анализ, сделанный на основе материалов пункции и аспирации, бывает неточным. Пункционный забор способствует распространению заражённых клеток.

Трепан-биопсия

Трепан-биопсия – передовой метод для обнаружения раковых и доброкачественных образований с использованием специальной иглы с резьбой. Это распространённая практика, относящаяся к биопсии. При проведении процедуры получают больший по размеру образец ткани, чем при пункционном варианте, из-за специального строения инструмента. В современной медицине пользуются популярностью специализированные пистолеты, позволяющие практически безболезненно взять биологический материал из поражённого участка.

Особенности биопсии

Все вышеописанные методы занимают около 5-10 мин., проводятся под местным наркозом, допускаются неприятные безболезненные ощущения. Если узлы расположены в труднодоступных местах, операция займет от 20 минут до часа.

Пунктуационный анализ возможен без наркоза, считается, что это безболезненная операция.

Результат готовится от одной до двух недель.

Врач, специализирующийся на биопсии, изучает собранный биологический материал. Он выявляет начальные стадии рака.

Цитология лимфомы

Помимо гистологического исследования клеток, распространено цитологическое. Разница между ними заключается в том, что для первого метода используются отдельные кусочки ткани, а для второго – клетки. Это позволяет в различных областях медицины, к примеру, в гинекологии не подвергать травмированию большую часть органов.

Операция выполняется либо сидя, либо лёжа, в зависимости от расположения лимфоузлов. Соблюдаются все правила гигиены, дезинфекции, антисептики. Изначально вводят иглу без шприца, затем, убедившись в её правильном расположении, делают несколько всасывающих движений. Игла, меняя направление, подцепляет участки ткани с различных мест, чтобы уменьшить риск ошибки при исследовании. Место оперирования заклеивают бактерицидным пластырем или накладывают швы, исходя из вида операции.

Биопсия сигнального лимфоузла

Ткань, наиболее подверженная злокачественным образованиям – сигнальные лимфоузлы. Биопсия способна не только выявить метастазы, но и способствует удалению исключительно раковых клеток, не затрагивая здоровые участки.

Алгоритм проведения процедуры: в место первичного заражения сторожевого узла вводят безопасную для здоровья краску либо радиоактивный элемент. Далее врачи наблюдают за состоянием всей системы: первый изменивший цвет узел будет удалён, чтобы предотвратить дальнейшее распространение злокачественных клеток.

«Жидкая биопсия»

В 2014 году врачи открыли совершенно новую методику, позволяющую обнаружить поражённые клетки до того, как они станут опасными для жизни и здоровья человека. Прежде способ применялся исключительно для лабораторных опытов и не был доступен для реального лечения. Теперь же его внедряют повсеместно для упрощения проведения биопсии.

Последствия, осложнения

Большая часть пациентов переносят биопсию без последствий и осложнений. Однако бывают случаи, что у людей проявляются симптомы:

слабость в теле;
боли в области головы, головокружения;
защемление или повреждение нерва;
внутреннее кровотечение, если хирург повредил сосуд;
попадание бактерий из-за недостаточной обработки инструментов и места проведения операции;
вытекание лимфы.

У пациентов возможны слабость, озноб, обмороки, повышение температуры, боли на месте проведения операции на восстановительном периоде. Пациент должен незамедлительно обратиться к лечащему врачу, чтобы избежать осложнений, опасных для жизни.

Восстановление после операции

Как правило, реабилитация происходит быстро, потому что операция проводится скоротечно и почти безболезненно. При первых двух описанных выше методах остается небольшая ранка. Её необходимо обработать с помощью антисептического средства, перевязать стерильным бинтом. При открытом методе остаются швы, их необходимо содержать в чистоте. Снятие специальных нитей с ран происходит через неделю.

Если на месте, где проводилась операция, возникают неприятные ощущения, боль, отёк, краснота, то следует обратиться к лечащему врачу. Это могут быть симптомы интоксикации и занесения какого-либо заражения внутрь организма. Помощь, оказанная вовремя, может спасти жизнь.

Если болезненные ощущения не носят инфекционный характер, то врач подберет хорошее обезболивающее.

Первое время после проведения процедуры нельзя мочить ранку. От воды следует оберегаться в течение 3-4 дней, исходя из глубины и ощущений. Следует избегать физкультуры и спорта, потому что перегрузка организма может негативно сказаться на швах и ранке: возможно раскрытие раны и оставшийся шрам.

Пациентам рекомендуется носить свободную, не обтягивающую одежду во время восстановительного периода.

Цена процедуры

Ценник на операцию зависит от места для оперирования, сложности и длительности. Минимальная оплата за биопсию лимфоузлов составляет 1500 рублей, максимум – 7000 рублей. При этом стоит учитывать и тип наркоза (местный или общий), цены частных клиник, опыт специалиста.

Таким образом, биопсия лимфоузлов – это действенный метод борьбы с новообразованиями, выявления их качества с наименьшими последствиями для организма. У 90% пациентов биопсия прошла удачно и результативно.

Источник